区分clade 2．3．2．1和clade 2．3．4．4 H5 AIV的实时荧光定量PCR引物

摘要

本发明提供了一组区分clade 2.3.2.1和clade 2.3.4.4 H5 AIV的实时荧光定量PCR引物，利用clade 2.3.2.1和clade 2.3.4.4 H5 AIV血凝素基因（HA）特征性核苷酸序列存在GC含量差异来设计。利用本组引物对clade 2.3.2.1和clade 2.3.4.4 H5 AIV进行实时荧光定量PCR反应均可有效扩增，但其在clade 2.3.2.1和clade 2.3.4.4 H5 AIV的实时荧光定量PCR反应后生成的熔解曲线存在熔解温度（Tm值）差异来对clade 2.3.2.1和clade 2.3.4.4 H5 AIV进行有效区分。配合和实时荧光定量PCR仪器连接的电脑并利用仪器自带的分析软件，可达到仅需一组引物，即可特异性的对clade 2.3.2.1和clade 2.3.4.4 H5 AIV感染情况进行鉴别诊断。本发明鉴定方法简单，效率和准确率较高。