Sortase A介导的(S)-羰基还原酶寡聚体高效催化(S)-苯基乙二醇的合成

摘要

本发明公开了Sortase A介导的(S)‑羰基还原酶寡聚体高效催化(S)‑苯基乙二醇的合成，属于生物催化不对称转化术领域。本发明将引入SrtA识别序列的(S)‑羰基还原酶进行纯化，同时纯化得到SrtA纯酶，利用SrtA介导的连接反应，得到(S)‑羰基还原酶寡聚体；以分离得到的寡聚体为催化剂，2‑羟基苯乙酮为底物，反应时间3小时，产物(S)‑苯基乙二醇光学纯度达到100％e.e.，产率为99％；相比于原始酶，寡聚体的酶活提高了6倍，催化转化(S)‑苯基乙二醇的时间缩短了16倍，热稳定性提高了10℃。本发明利用SrtA介导的蛋白质连接解决了羰基还原酶催化效率低，热稳定性差的缺陷，为高效制备(S)‑苯基乙二醇提供了有效途径，为蛋白质改造领域提供了新的方向。