人源化PD-L1肿瘤细胞系及具有该细胞系的动物模型与应用

摘要

本发明提供了一种人源化PD‑L1肿瘤细胞系，所述细胞系为MC‑38‑hPD‑L1，并建立具有人源化PD‑L1肿瘤细胞系的动物肿瘤模型，同时揭示了一种人源化PD‑L1肿瘤细胞系的构建方法，具体通过CRISPR‑CAS9敲除动物源的PD‑L1，扩大培养获得敲除细胞库，提取DNA进行PCR扩增，回收扩增产物并进行克隆，最后通过慢病毒体系将人源PD‑L1在mPD‑L1 KO的MC‑38细胞系中过表达，随后进行慢病毒的包装及Puromycin筛选获得人源化的PD‑L1的MC‑38细胞系。结果显示抗体治疗后的肿瘤浸润CD8 T淋巴细胞明显表现出更强的杀伤和增殖能力，此外我们也发现抗体治疗后肿瘤浸润的Treg细胞明显被抑制。这从分子机理上进一步证明该方法有效可行。