巨大芽孢杆菌内切葡聚糖酶的基因及其制备方法

摘要

巨大芽孢杆菌内切葡聚糖酶的基因及其制备方法，属于生物技术领域。在小麦根部土壤中筛选获得巨大芽孢杆菌Ap25，菌种保藏号是：CGMCC No.1213，经检测具有内切葡聚糖酶活性。利用SDS、蛋白酶K、CTAB/NaCl方法提取巨大芽孢杆菌基因组DNA，用Sau3A进行部分酶切，酶切后的基因片段同已线性化质粒pBluescriptII连接，转化大肠杆菌DH5α，通过内切葡聚糖酶酶活性检测，筛选阳性克隆子共74株，提取酶活性表达较好的转化子中的重组质粒，获得了内切葡聚糖酶编码基因片段共941bp。本发明基因片段沿着多糖链可以随意水解β-键，释放出寡糖，降解病原真菌的细胞壁，抑制真菌生长，达到生防效果。