高接合转移率的希瓦氏菌WP3菌株及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了一株高接合转移率希瓦氏菌WP3菌株及其构建方法和应用；所述构建方法包括以下步骤：对深海细菌希瓦氏菌WP3全基因组限制‑修饰系统相关基因进行预测；对预测到的三个限制酶基因分别设计基因敲除引物；以WP3ΔSW1为出发菌株，依次敲除所述的三个限制酶基因，相应获得限制酶基因缺失菌株，所述限制酶基因缺失菌株即为高结合转移率的菌株；相比于基因工程出发菌株WP3ΔSW1，本发明所得菌株结合转移效率明显提高，获得的单交换克隆子阳性率高，筛选单交换克隆子的工作量明显减少；在高结合转移率的菌株的基础上，通过同源重组至少可以一次性删除41kb的基因组DNA片段，有利于进一步的基因组改造。