蛋白质N末端肽段的在线分离装置及使用方法

摘要

本发明属于生物分析和检测技术领域，具体为一种蛋白质N末端肽段的在线分离装置及使用方法。该装置包括：两台高压泵、六通阀、四通阀、三通阀、C18柱和巯基肽段捕集柱以及相关连接部件。本发明中，蛋白质固定于填充C18疏水性填料的毛细管柱中，进而进行柱上氨基封闭，柱上酶解，酶解肽段固相巯基衍生，巯基肽段捕集柱捕集非N末端肽段，实现N末端肽段的在线分离。固相的蛋白封闭反应可以减少除盐过程中的损失，简化实验步骤，缩短样品反应时间；同时，可以通过采用过量的衍生试剂，实现肽段高效快速的巯基衍生。本发明通过在线装置，使得反应时间缩短，减少样品转移，减少样品损失，缩短除盐等预处理步骤的耗时，提高蛋白质N末端肽段鉴定效果。