一种以RNA介导的特异性敲除双基因获得基因编辑绵羊的方法及其专用sgRNA

摘要

本发明公开了一种以RNA介导的特异性敲除双基因获得基因编辑绵羊的方法及其专用sgRNA。本发明的sgRNA组合由sgRNA_MSTN‑1和sgRNA_FGF5‑1组成；sgRNA_MSTN‑1为能特异靶向修饰绵羊MSTN基因的sgRNA，为序列6第2至21位核苷酸所示的RNA或具有序列6第2至21位核苷酸的RNA；sgRNA_FGF5‑1为能特异靶向修饰绵羊FGF5基因的sgRNA，为序列8第2至21位核苷酸所示的RNA或具有序列8第2至21位核苷酸的RNA。本发明将CRISPR/Cas9基因组编辑技术与显微注射技术相结合，不仅使绵羊打靶效率更高更准确，而且在一个世代内首次实现了绵羊双基因敲除，大大促进了绵羊产肉、产毛双性能的改良，为绵羊新品种培育提供了更为广阔的空间和更有效的技术工具。