基于CRISPR/Cas9构建基因编辑小鼠sgRNA有效性验证研究

摘要

以小鼠S100A9基因为例,设计针对该基因的sgRNA,体外转录后与Cas9 mRNA通过显微注射入受精卵,选取囊胚期的胚胎,单枚独立进行基因型分析,并综合得出编辑效率.结果表明,显微注射113枚受精卵,其中28枚成功发育到囊胚期,其中有5枚囊胚在特定位点产生了基因突变,总编辑效率为18％.该方法操作简单,可快速对sgRNA活性进行体内验证,并为后续基因编辑小鼠的制备提供基础.