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微量起始DNA的高通量测序文库构建方法及其所构建的高通量测序文库

摘要

本发明提供了一种微量起始DNA的高通量测序文库构建方法及其所构建的高通量测序文库。该构建方法包括:对样本DNA进行物理打断,得到片段化DNA;对片段化DNA进行末端修复及加A,得到修复DNA;利用连接增强剂对修复DNA进行接头连接,得到带接头片段;以及对带接头片段进行扩增,得到高通量测序文库;连接增强剂为DMSO、乙醇、乙二醇或甘油。通过在接头连接的步骤中添加具有连接增强作用的DMSO、乙醇、乙二醇或甘油等小分子物质,利用这些小分子物质刺激连接酶的活性中心区域来增强连接活性,提高接头连接效率,使更多修复DNA片段连上接头序列,从而提高了微量起始量样本的测序成功率。

著录项

  • 公开/公告号CN104894651B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2017-04-12

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 天津诺禾医学检验所有限公司;

    申请/专利号CN201510369505.X

  • 申请日2015-06-29

  • 分类号C40B40/06(20060101);C40B50/06(20060101);C12Q1/68(20060101);

  • 代理机构11240 北京康信知识产权代理有限责任公司;

  • 代理人赵囡囡;吴贵明

  • 地址 301700 天津市武清区武清开发区创业总部基地B07

  • 入库时间 2022-08-23 09:55:05

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2017-04-12

    授权

    授权

  • 2015-10-07

    实质审查的生效 IPC(主分类):C40B 40/06 申请日:20150629

    实质审查的生效

  • 2015-09-09

    公开

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