斑马鱼卵黄原蛋白间接竞争ELISA试剂盒及其检测方法与应用

摘要

斑马鱼卵黄原蛋白间接竞争ELISA试剂盒及其检测方法与应用。通过两步层析与超滤相结合的方法从斑马鱼卵巢与17β-雌二醇暴露后的斑马鱼体内中分别纯化出卵黄脂磷蛋白与卵黄原蛋白，制备兔抗斑马鱼卵黄原蛋白多克隆抗体；将斑马鱼卵黄脂磷蛋白纯品、兔抗斑马鱼卵黄原蛋白多克隆抗体、空白96孔酶标板1块、以及包被液、洗涤液、封闭液、样品稀释液、显色液、终止液和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗各1支共同装入盒体，得到检测斑马鱼卵黄原蛋白的间接竞争ELISA试剂盒。本发明的试剂盒可以应用于环境类雌激素物质的调查中，能够灵敏、准确、方便的定量检测斑马鱼血浆、整体匀浆液、肝脏组织及肝细胞培养液中的卵黄原蛋白，检测范围为31.25～1000ng？mL