一种草鱼肿瘤坏死因子α基因的重组表达方法

摘要

本发明涉及草鱼肿瘤坏死因子alpha（TNF-α）蛋白重组表达及纯化技术。本发明提出草鱼肿瘤坏死因子α的原核重组表达方法，利用克隆技术得到草鱼肿瘤坏死因子α基因的cDNA全序列，并将草鱼肿瘤坏死因子α基因的成熟肽序列构建原核表达载体，筛选得到高效表达草鱼肿瘤坏死因子α的原核表达体系，并以IPTG诱导重组草鱼肿瘤坏死因子α蛋白的表达，利用亲和层析对表达产物进行多级纯化，获得高纯度体外表达重组草鱼肿瘤坏死因子α蛋白。通过本发明的技术方案可以工业化生产重组草鱼肿瘤坏死因子α蛋白，一方面用于淡水鱼类免疫机制的理论研究；另一方面用于鱼类免疫增强剂、病害防治药物等生产应用。