沙漠齿肋赤藓实时荧光定量PCR内参分子的筛选方法

摘要

本发明涉及一种沙漠齿肋赤藓实时荧光定量PCR内参分子的筛选方法，该方法利用齿肋赤藓转录组数据库，选取15个内参候选基因，以15个内参基因为模板设计实时荧光定量PCR的内参基因特异引物，选取受10种非生物胁迫和没有胁迫（对照）的齿肋赤藓配子体为实验材料进行荧光定量PCR实验，运用geNorm，NormFinder和Refinder软件进行荧光定量数据的分析，从而筛选出齿肋赤藓开展各种非生物胁迫下荧光定量研究的最适合，最稳定的内参分子是CDPK和α-TUB2。用本发明所述方法可避免不同非生物胁迫下的齿肋赤藓配子体材料在RNA质量，产量及反转录效率等上的存在的误差，能更好的对实时荧光定量检测的数据进行校正和标准化，提高了该种基因定量研究的准确性和可靠性。