一种沙漠植物准噶尔无叶豆实时荧光定量PCR内参分子的筛选方法

摘要

本发明涉及一种沙漠植物准噶尔无叶豆实时荧光定量PCR内参分子的筛选方法，该方法利用同源克隆对准噶尔无叶豆中的8个内参基因进行了克隆，并设计实时荧光定量PCR的内参基因特异引物，选取受10种非生物胁迫和没有胁迫(对照)的两周大幼苗为实验材料进行荧光定量PCR实验验证，运用geNorm软件进行荧光定量数据的分析，从而筛选出准噶尔无叶豆幼苗开展各种非生物胁迫下荧光定量研究的最适合，最稳定的内参分子是EF和α-tubulin。用本发明所述方法可避免不同非生物胁迫下的准噶尔无叶豆幼苗材料在RNA质量，产量及反转录效率等上的存在的误差，能更好的对实时荧光定量检测的数据进行校正和标准化，提高了研究的准确性和可靠性。