一种产生庆大霉素C1a的工程菌及其构建方法

摘要

本发明属于医药技术领域，涉及一种主要产生庆大霉素C1a的工程菌及其构建方法，是利用基因阻断技术对庆大霉素产生菌棘孢小单孢菌中的6’-C-甲基转移酶基因gntK进行破坏，以阻断庆大霉素C1，C2和C2a的合成，使其主要产生庆大霉素C1a和少部分的庆大霉素C2b。原始菌株中C1a，C2，C2a和C1的含量分别为6.5%，45.3%，20.1%和27.1%，而阻断株中的C1a和C2b的含量分别为94.0%和6.0%。本发明通过框架内删除失活的方法破坏棘孢小单孢菌中gntK基因，包括gntK基因阻断质粒的构建，阻断质粒转化棘孢小单孢菌，双交换菌株的筛选以及发酵产物的分析。本发明所构建的工程菌，不含有任何抗性标记，通过连续传代，庆大霉素C1a产量非常稳定。