高温环境下海水鱼类体表粘液功能蛋白检测方法

摘要

一种高温环境下海水鱼类体表粘液功能蛋白检测方法，首先收集鱼类体表粘液，其次粗提体表粘液蛋白；再利用双向电泳技术得到体表粘液蛋白图谱；之后再利用Imagemaster 2D Platinum 6.0图像分析软件进行图像分析，查找到差异显著的蛋白点；进行MALDI-TOF-TOF质谱分析，采用PMF技术和MASCOT、NCBI网站提供的检索工具进行鉴定，得到与高温胁迫相关的功能蛋白。本发明中采用简便的无菌塑料吸管收集粘液，快速、简便，并可快速分装，在-80℃下可保存一年以上；本发明中双向电泳等点聚焦电泳程序可将盐离子除净，得到的蛋白点清晰，圆滑，可以更加准确的对体表粘液功能蛋白定位定量。本发明适用于海水鱼类体表粘液蛋白在高温环境下的差异性表达、功能蛋白确定等检测技术。