欧、美型猪繁殖与综合症病毒抗体鉴别诊断试剂盒的制备方法

摘要

本发明提供一种欧、美型猪繁殖与综合症病毒抗体鉴别诊断试剂盒的制备方法，该方法是针对PRRSV VR-2332株的ORF7基因中欧、美型毒株的保守表位25aa～30aa，37aa～52aa及50aa～66aa的基因缺失，构建针对美洲型PRRSV N蛋白的原核表达载体pGEX-6P-1-N；针对欧洲型PRRSV N蛋白表位2aa～12aa、40aa～46aa及67aa～128aa的氨基酸序列，建立针对欧洲型PRRSVN蛋白的原核重组表达载体PQE30-N，重组质粒在大肠杆菌中成功表达，利用表达纯化的北美洲型N蛋白，制备用于PRRS抗体检测的间接ELISA诊断试剂盒，该抗体试剂盒与IDEXX试剂盒的符合率均可达到90％，以纯化的欧洲型蛋白作为包被抗原，优化了欧洲型PRRSV抗体检测间接ELISA方法，为PRRS抗体分型检测打下基础。