绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A对大鼠血脂影响的试验方法

摘要

本发明公开了绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A对大鼠血脂影响的试验方法，具体按照如下操作步骤：S1：药物试剂调配，S2：实验目标体征培养，S3：实验目标分组，S4：目标组织获取及处理，S5：数据观察及处理，S6：数据统计，本发明通过绞股蓝皂苷A是绞股蓝中含量较高的有效单体成分，绞股蓝皂苷XLIX是绞股蓝含量最高的活性特征成分之一，性质稳定专属性强。通过将绞股蓝皂苷XL1X与绞股蓝皂苷A的降血脂作用进行比较，结果发现：绞股蓝皂苷A具有降血脂作用，能降低高脂大鼠血脂TC和的LDL‑C含量，升高HDL‑C含量。绞股蓝皂苷XLIX亦具有降血脂活性，其除了能降低TC和的LDL‑C含量外，对TG水平也有抑制作用。

说明书

技术领域

本发明属于医学实验技术领域，具体涉及绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A对大鼠血脂影响的试验方法。

背景技术

绞股蓝皂苷为葫芦科植物绞股蓝的干燥地上部分，又名七叶胆、甘茶蔓、小苦药、公罗锅底。乌足状复叶对生，花单性异株，花小，淡绿白色。全草入药，清热解毒，止咳祛痰。山坡林缘、沟渠边、灌丛间可发现。具清热解毒、止咳祛疾之功能。

高血脂症是一种以血脂代谢异常为特征的疾病，其临床特征表现为循环中总胆固醇、总甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇升高，高密度脂蛋白降低。高血脂症的发病率目前呈逐年上升的趋势，其危害在于可诱发动脉粥样硬化、冠心病、脑梗死等心脑血管疾病，是心脑血管疾病的危险因素。因此降血脂对高血脂症的治疗至关重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种木质素在酚醛树脂模塑料，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A对大鼠血脂影响的试验方法，具体按照如下操作步骤：

S1：药物试剂调配，绞股蓝皂苷XLIXC，含量80-90％、绞股蓝皂苷A，含量80-90％、辛伐他汀片、水合氯醛、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血糖试剂盒；

S2：实验目标体征培养，体重200-300g的SD大鼠108只，高脂饲料，自制：包括质量份数为1-3份胆固醇、9-12份猪油、0.2-1份甲基硫氧嘧啶、0.25-0.75份胆酸钠、80-90份基础饲料，分餐饲养，自由饮水；

S3：实验目标分组，108只大鼠经适应性饲养三天后随机分为9组：正常组、模型组、阳性药组、绞股蓝皂苷XLIX高、中、低组和绞股蓝皂苷高、中、低组，每组12只，正常组给予普通饲料，其余给予高脂饲料，造模3-5周后，大鼠禁食12h眼眶釆血，测定TG、TC等血脂指标，以检测模型，灌胃给药，药物高、中、低剂量为55-65、25-35和10-20mg/kg，阳性组剂量为1-3mg/kg；

S4：目标组织获取及处理，大鼠给药4周后，禁食16h，20％乌拉坦麻醉，腹主动脉釆血，3000rpm/min离心lOmin，取血清-80℃保存备用，按照试剂盒操作测定TC、TG，LDL-C、HDL-C和血糖的含量；

S5：数据观察及处理，取部分肝组织块，4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，进行病理组织学检査；

S6：数据统计，计量资料以均数士标准差(x±s)表示，数据用SPSS22.0软件进行统计分析，计量资料釆用t检验。

作为优选的，步骤S3中灌胃体积7-11ml/kg，每日1-3次，连续灌胃3-5周。

作为优选的，步骤S4中离心的设备选用高速冷冻离心机，并用电热恒温水浴锅进行低温保存。

作为优选的，步骤S6中的计数资料釆用X

本发明的技术效果和优点：

本发明通过绞股蓝皂苷A是绞股蓝中含量较高的有效单体成分，绞股蓝皂苷XLIX是绞股蓝含量最高的活性特征成分之一，性质稳定专属性强。通过将绞股蓝皂苷XL1X与绞股蓝皂苷A的降血脂作用进行比较，结果发现：绞股蓝皂苷A具有降血脂作用，能降低高脂大鼠血脂TC和的LDL-C含量，升高HDL-C含量。绞股蓝皂苷XLIX亦具有降血脂活性，其除了能降低TC和的LDL-C含量外，对TG水平也有抑制作用。另外，绞股蓝皂苷XLIX还能降低大鼠血糖水平，表现出更强的降脂活性。

综上所述，绞股蓝皂苷XLIX与绞股蓝皂苷A均具有降血脂作用，绞股蓝皂苷XL1X具有降血糖作用。与绞股蓝皂苷A相比，绞股蓝皂苷XLIX对大鼠血清TG、LDL-C的降低、对HDL-C含量的提高作用更显著。与绞股蓝皂苷A相比，绞股蓝皂苷XLIX可减轻高脂饲料喂养大鼠肝脏组织病理损伤。

附图说明

图1为本发明中具体操作步骤流程结构示意图；

图2为本发明中绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A对大鼠肝组织病理形态的影响对照实物图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A对大鼠血脂影响的试验方法，具体按照如下操作步骤：

S1：药物试剂调配，绞股蓝皂苷XLIXC，含量80％、绞股蓝皂苷A，含量80％、辛伐他汀片、水合氯醛、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血糖试剂盒；

S2：实验目标体征培养，体重200g的SD大鼠108只，高脂饲料，自制：包括质量份数为1份胆固醇、9份猪油、0.2份甲基硫氧嘧啶、0.25份胆酸钠、80份基础饲料，分餐饲养，自由饮水；

S3：实验目标分组，108只大鼠经适应性饲养三天后随机分为9组：正常组、模型组、阳性药组、绞股蓝皂苷XLIX高、中、低组和绞股蓝皂苷高、中、低组，每组12只，正常组给予普通饲料，其余给予高脂饲料，造模3-5周后，大鼠禁食12h眼眶釆血，测定TG、TC等血脂指标，以检测模型，灌胃给药，灌胃体积7ml/kg，每日1次，连续灌胃3周，药物高、中、低剂量为55、25-35和10mg/kg，阳性组剂量为1mg/kg；

S4：目标组织获取及处理，大鼠给药4周后，禁食16h，20％乌拉坦麻醉，腹主动脉釆血，3000rpm/min离心lOmin，取血清-80℃保存备用，按照试剂盒操作测定TC、TG，LDL-C、HDL-C和血糖的含量，离心的设备选用高速冷冻离心机，并用电热恒温水浴锅进行低温保存；

S5：数据观察及处理，取部分肝组织块，4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，进行病理组织学检査；

S6：数据统计，计量资料以均数士标准差(x±s)表示，数据用SPSS22.0软件进行统计分析，计量资料釆用t检验，计数资料釆用X

实施例2

绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A对大鼠血脂影响的试验方法，具体按照如下操作步骤：

S1：药物试剂调配，绞股蓝皂苷XLIXC，含量90％、绞股蓝皂苷A，含量90％、辛伐他汀片、水合氯醛、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血糖试剂盒；

S2：实验目标体征培养，体重300g的SD大鼠108只，高脂饲料，自制：包括质量份数为3份胆固醇、12份猪油、1份甲基硫氧嘧啶、0.25-0.75份胆酸钠、80-90份基础饲料，分餐饲养，自由饮水；

S3：实验目标分组，108只大鼠经适应性饲养三天后随机分为9组：正常组、模型组、阳性药组、绞股蓝皂苷XLIX高、中、低组和绞股蓝皂苷高、中、低组，每组12只，正常组给予普通饲料，其余给予高脂饲料，造模3-5周后，大鼠禁食12h眼眶釆血，测定TG、TC等血脂指标，以检测模型，灌胃给药，灌胃体积11ml/kg，每日1-3次，连续灌胃5周，药物高、中、低剂量为65、35和20mg/kg，阳性组剂量为3mg/kg；

S4：目标组织获取及处理，大鼠给药4周后，禁食16h，20％乌拉坦麻醉，腹主动脉釆血，3000rpm/min离心lOmin，取血清-80℃保存备用，按照试剂盒操作测定TC、TG，LDL-C、HDL-C和血糖的含量，离心的设备选用高速冷冻离心机，并用电热恒温水浴锅进行低温保存；

S5：数据观察及处理，取部分肝组织块，4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，进行病理组织学检査；

S6：数据统计，计量资料以均数士标准差

实施例3

绞股蓝皂苷XLIX和绞股蓝皂苷A对大鼠血脂影响的试验方法，具体按照如下操作步骤：

S1：药物试剂调配，绞股蓝皂苷XLIXC，含量82.3％、绞股蓝皂苷A，含量85.2％、辛伐他汀片、水合氯醛、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血糖试剂盒；

S2：实验目标体征培养，体重250g的SD大鼠108只，高脂饲料，自制：包括质量份数为11.5份胆固醇、10份猪油、0.25份甲基硫氧嘧啶、0.5份胆酸钠、87.75份基础饲料，分餐饲养，自由饮水；

S3：实验目标分组，108只大鼠经适应性饲养三天后随机分为9组：正常组、模型组、阳性药组、绞股蓝皂苷XLIX高、中、低组和绞股蓝皂苷高、中、低组，每组12只，正常组给予普通饲料，其余给予高脂饲料，造模4周后，大鼠禁食12h眼眶釆血，测定TG、TC等血脂指标，以检测模型，灌胃给药，灌胃体积10ml/kg，每日2次，连续灌胃4周，药物高、中、低剂量为60、30和15mg/kg，阳性组剂量为2mg/kg；

S4：目标组织获取及处理，大鼠给药4周后，禁食16h，20％乌拉坦麻醉，腹主动脉釆血，3000rpm/min离心lOmin，取血清-80℃保存备用，按照试剂盒操作测定TC、TG，LDL-C、HDL-C和血糖的含量，离心的设备选用高速冷冻离心机，并用电热恒温水浴锅进行低温保存；

S5：数据观察及处理，取部分肝组织块，4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，进行病理组织学检査；

S6：数据统计，计量资料以均数士标准差

对大鼠血脂水平的影响：

结果见表1,与正常组相比，模型组TC、TG和LDL-C含量增加(P<0.05或F<0.01)：与模型组相比，阳性药辛伐他汀显著降低了大鼠血清中TC、TG和LDL-C含量，提高了HDL-C的含量，表明高血脂症大鼠造模成功。绞股蓝皂昔A高、中、低剂量组均显著降低大鼠血清中TC的含量(P<0.05),绞股蓝皂昔A高剂量组显著降低了大鼠血清中LDL-C含量(P<0.05),升高了HDL-C的含量(P<0.05)。绞股蓝皂昔XLIX高、中、低剂量组均显著降低大鼠血清中TC和LDL-C的含量(P<0.05或P<0.01),中、低剂量组显著降低大鼠血清中TG的含量(P<0.05)，低剂量组显著提高了血清中HDL-C的含量(F<0.05).与絞股蓝皂昔A相比，绞股蓝皂昔XLIX对大鼠血清TG、LDL-C的降低、对HDL-C的含量的提高作用更显著。表1絞股蓝皂昔XLIX和绞股蓝皂昔A对高血脂症大鼠血清TC、TG、LDL-C和HDL-C含量的影响

注：**P<0.01，*P<0.05v.s.正常组；*P<0.05v.s.模型组表1

对大鼠血糖水平的影响：

结果见表2，与正常组相比，模型组血糖含量增加(P<0.05)；与模型组相比，阳性药辛伐他汀显著降低了大鼠动脉血中的血糖(P<0.05)；绞股蓝皂昔A高、中、低剂量组对血糖均无显著影响，绞股蓝皂昔XLIX中剂量组显著降低了大鼠血糖(P<0.05),而髙、低剂量组对血糖的影响无显著差异。

表2绞股蓝皂昔XLIX和絞股蓝皂昔A对高血脂症大鼠血糖的影响

注：*P<0.05v.s.正常组；#P<0.05v.s.模型组

对大鼠肝组织病理形态的影响

由图1所见，模型组与正常组相比，肝脏组织可见肝细胞脂肪变性、肝细胞气球样变、炎细胞浸润等病理损伤，与模型组相比，阳性对照组、绞股蓝皂昔XLIX低、中、高剂量组可明显改善肝脏组织病理损伤；与模型组相比，

绞股蓝皂昔A中、高剂量组并未明显减轻大鼠肝脏组织病理损伤。

本发明通过绞股蓝皂苷A是绞股蓝中含量较高的有效单体成分，绞股蓝皂苷XLIX是绞股蓝含量最高的活性特征成分之一，性质稳定专属性强。通过将绞股蓝皂苷XL1X与绞股蓝皂苷A的降血脂作用进行比较，结果发现：绞股蓝皂苷A具有降血脂作用，能降低高脂大鼠血脂TC和的LDL-C含量，升高HDL-C含量。绞股蓝皂苷XLIX亦具有降血脂活性，其除了能降低TC和的LDL-C含量外，对TG水平也有抑制作用。另外，绞股蓝皂苷XLIX还能降低大鼠血糖水平，表现出更强的降脂活性。

综上所述，绞股蓝皂苷XLIX与绞股蓝皂苷A均具有降血脂作用，绞股蓝皂苷XL1X具有降血糖作用。与绞股蓝皂苷A相比，绞股蓝皂苷XLIX对大鼠血清TG、LDL-C的降低、对HDL-C含量的提高作用更显著。与绞股蓝皂苷A相比，绞股蓝皂苷XLIX可减轻高脂饲料喂养大鼠肝脏组织病理损伤。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。