一种通过BOP诱导胰腺癌肝肺转移动物模型的制作方法

摘要

本发明公开了一种通过BOP诱导胰腺癌肝肺转移动物模型的制作方法，针对动物模型对于胰腺癌肝肺转移发病机制，治疗靶点，药物研制中具有重要的作用；然后目前国内对于成熟的胰腺癌肝肺转移模型及其制作还处于缺乏状况，这一现象制约着胰腺癌肝肺转移的发病机制和诊治研究；本发明利用BOP(N‑亚硝基双(2‑氧丙基)胺)诱导小鼠胰腺癌肝肺转移，且成功诱导出符合临床标准的胰腺癌转移模型，为胰腺癌肝肺转移的临床诊治提供了稳定的研究资源。

说明书

技术领域

本发明属于医疗研究动物模型制作技术领域，具体涉及一种通过BOP诱导胰腺癌肝肺转移动物模型的制作方法。

背景技术

胰腺癌是一种高度的恶性肿瘤，预后极差，出现肝肺转移的情况就更为严重，未接受治疗的胰腺癌患者的生存周期大约为四个月，接受了手术治疗的患者生存期约为七个月，切除手术后，患者一般能存活12个月左右；

早期诊断和早期治疗是提高和改善胰腺癌肝肺转移预后的关键，清楚掌握胰腺癌及肝肺转移的发病机制，寻找胰腺癌肝肺转移的新型治疗靶点对于胰腺癌及胰腺癌肝肺转移的诊治具有重要意义；

动物模型对于胰腺癌肝肺转移发病机制，治疗靶点，药物研制中具有重要的作用；然后目前国内对于成熟的胰腺癌肝肺转移模型及其制作还处于缺乏状况，这一现象制约着胰腺癌肝肺转移的发病机制和诊治研究。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种通过BOP诱导胰腺癌肝肺转移动物模型的制作方法，以BOP(N-亚硝基双(2-氧丙基)胺)注射仓鼠，经诊断检测后，BOP成功诱导出符合临床标准的胰腺癌肝肺转移动物模型；

为了达到上述技术目的，本发明是通过以下技术方案实现的：一种通过BOP诱导胰腺癌肝肺转移动物模型的制作方法，包括以下步骤：

S1：选取健康状况良好的仓鼠，相同环境和干净饲养条件下饲养一周；

S2：将仓鼠进行筛选后，按照10mg/kg的剂量，从背部皮下注射BOP，持续注射8周；

S3：在第16/20/24周后分别进行取肝脏、胰腺、肺作石蜡包埋病例切片。

本发明的有益效果是：

通过本发明提供的胰腺癌肝肺转移动物模型制作方法，利用BOP皮下注射，成功诱导出符合临床标准的胰腺癌肝肺转移模型，为胰腺癌肝肺转移的临床诊治提供了稳定的研究资源。

附图说明

图1是本发明的BOP诱导的胰腺癌模型过程图；1(A)为诱导周期及取材周期图；1(B)为仓鼠模拟出现黄疸，表明符合胰腺癌临床表现；1(C)为血浆内CA19-9的浓度的测试结果图；1(D)为仓鼠胰腺癌肝转移影像及标本图；

图2(A)是本发明的人类胰腺癌组织标本染色切片显微放大图；2(B)是BOP诱导模型的胰腺癌组织切片标本染色切片显微放大图；2(C)是SW1990细胞株裸鼠移植瘤的组织标本染色切片显微放大图；

图3(A)是BOP诱导模型的转移癌病灶标本图；3(B)是BOP诱导模型的肝转移癌组织切片显微放大图；3(C)是移植瘤模型诱导的肝转移癌组织切片显微放大图；

图4(A)是BOP诱导模型的肺转移癌组织切片显微放大图；4(B)是SW1990细胞株的裸鼠移植瘤模型肺转移情况组织切片显微放大图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种通过BOP诱导胰腺癌肝肺转移动物模型的制作方法，包括以下步骤：

S1：选取健康状况良好的仓鼠，相同环境和干净饲养条件下饲养一周；

S2：将仓鼠进行筛选后，治疗组按照10mg/kg的剂量，从背部皮下注射BOP，持续注射8周；

S3：在第16/20/24周后分别进行取肝脏、胰腺、肺作石蜡包埋病例切片。

实施例2

对照组采用SW1990细胞株的裸鼠移植瘤模型；

胰腺癌诱导SW1990细胞株于小鼠皮下注射，形成胰腺癌瘤源；小鼠生长25-30天后，取肝脏、胰腺、肺作石蜡包埋病例切片；

实验结果

如图2所示为胰腺癌组织标本切片显微放大示意图，其中图2(A)为人类胰腺癌的组织标本切片显微放大示意图；图2(B)为BOP诱导小鼠模型的胰腺癌组织标本切片显微放大示意图；图2(C)为SW1990细胞株裸鼠移植瘤的组织标本切片显微示意图；由图可看出，SW1990细胞株裸鼠移植瘤的组织标本与人类胰腺癌的组织形态差别大，缺乏肿瘤间质，不能很好的反应人类胰腺癌的组织学特征；

如图3所示为胰腺癌转移标本及组织病理切片显微放大示意图；其中图3(A)为BOP诱导的胰腺癌模型转移癌病灶；图3(B)为BOP诱导模型的肝转移癌，可看出其组织学结构与人类的胰腺癌肝转移的组织类型类似；图3(C)为SW1990细胞株裸鼠移植瘤模型的肝转移癌，可以看出跟人类胰腺癌的组织学结构差别较大，缺乏细胞异型性，不能很好模拟人类胰腺癌的转移病灶；

如图4(A)所示为BOP诱导的肺转移癌，图4(B)所示SW1990细胞株的裸鼠移植瘤模型不能成功诱导自发性肺转移，因此不是药物研发的良好动物模型。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。