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基于数字PCR检验类慢病毒体中平均每个病毒颗粒中Cas9 mRNA拷贝数的试剂盒

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本发明公开了一种基于数字PCR检验类慢病毒体中平均每个病毒颗粒中Cas9mRNA拷贝数的试剂盒；试剂盒中包括特异性检验Cas9mRNA的引物探针组以及特异性检验类慢病毒体单链RNA(ssRNA)基因组的引物探针组。本发明建立的方法及试剂盒通过提取类慢病毒体RNA核酸，然后逆转录成cDNA后运用数字PCR方法检测Cas9mRNA和ssRNA拷贝数，通过计算公式Cas9mRNA的相对拷贝数＝Cas9mRNA拷贝数/[ssRNA/2]进而获得平均每个病毒颗粒中Cas9mRNA的拷贝数。

著录项

公开/公告号CN115786585A

专利类型发明专利
公开/公告日2023-03-14

原文格式PDF
申请/专利权人上海本导基因技术有限公司;
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申请/专利号CN202211172146.5
发明设计人郝方元;唐武娜;
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申请日2022-09-26
分类号C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93;
代理机构上海段和段律师事务所;
代理人黄磊
地址 201100 上海市闵行区都会路1699号17幢B单元301、302、303、304室
入库时间 2023-06-19 18:49:33

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2023-03-14

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1. 基于数字PCR检测母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数的方法及试剂盒 [P] . 中国专利： CN111154841A . 2020-05-15
2. 基于数字PCR法的人SMN1与SMN2基因拷贝数检测试剂盒 [P] . 中国专利： CN111118151A . 2020-05-08
3. Control primer annealing to improve the specificity of annealing in nucleic acid amplification, kit, methods for amplifying nucleic acid sequences of DNA and sequence of target nucleic acid or a mixture of nucleic acids, to detect the complementari Dade of DNA to mRNA differentially expressed in two or more samples of nucleic acid.To amplify a fragment of the cDNA target quickly, to amplify a population of cDNAs of filament double full-length complementary to mRNAs cDNAs, and filament double fortified with 5 'complementary to mRNAs to amplify rather than a sequence of nucleotide al VO at the same time, to produce a digital printing gDNA DNA, and RNA in a sample of mRNA.To identify segments of homology is conserved in a multigene family from a sample of mRNA, to identify a variation of nucleotide in a target nucleic acid, for mutagenesis in a target nucleic acid, and use of the initiator [P] . BRPI0214741B1 . 2015-05-12

机译：控制引物退火以改善核酸扩增中退火的特异性，试剂盒，扩增DNA核酸序列和靶核酸序列或核酸混合物的方法，检测DNA与mRNA互补表达的互补性（两种）或更多核酸样品。要快速扩增cDNA靶标的片段，以扩增与mRNA cDNA互补的长丝两倍全长的cDNA群体，并用与mRNA互补的5'双重修饰的长丝进行扩增而不是序列同时鉴定一个核苷酸的VO片段，以产生一个数字印刷的gDNA DNA和一个mRNA样品中的RNA。从一个mRNA样品中鉴定一个多基因家族中的同源片段是保守的，以鉴定一个核苷酸中一个核苷酸的变异。靶核酸，用于在靶核酸中诱变，以及引发剂的用途
4. Control primer annealing to improve the specificity of annealing in nucleic acid amplification kit.Methods for amplifying a nucleic acid sequence of a DNA or a mixture of nucleic acids.And for selectively amplifying a nucleic acid sequence of a target DNA or a mixture of nucleic acids, and a sequence of the target nucleic acid from a mRNA.Method for detecting the complementarity of DNA to mRNA differentially expressed in two or more samples of nucleic acid, methods for amplifying a fragment of the cDNA and DNA quickly target.And to amplify a population of cDNAs of filament double full-length complementary to mRNAs cDNAs, and filament double fortified with 5 'complementary to mRNAs,Method to amplify rather than a sequence of nucleotu00ecdeo target at the same time, methods for producing a digital printing gDNA DNA, and RNA in a sample of mRNA.Method for identifying segments of homology is conserved in a family of multigene from a sample of mRNA, a method for the mutagenesis in a target [P] . BR0214741A . 2004-11-23

机译：控制引物退火，以提高核酸扩增试剂盒中退火的特异性。扩增DNA或核酸混合物的核酸序列的方法以及选择性扩增靶DNA或核酸混合物的核酸序列的方法用于检测DNA与两个或多个核酸样品中差异表达的mRNA的互补性的方法，扩增cDNA和DNA片段的方法可快速靶向。全长与mRNA cDNA互补的双细丝cDNA的cDNA群体，以及与mRNA互补的5'增强双细丝的cDNA，同时扩增而不是核苷酸靶序列的方法，产生数字印刷gDNA DNA的方法mRNA样品中的RNA和RNA.mRNA样品的多基因家族中用于鉴定同源片段的方法是保守的，这是一种在靶标中诱变的方法
5. lentiviral vector particle, pseudotyped lentiviral vector genome in an envelope, lentiviral vector packaging system for producing a pesudotyped lentiviral vector particle, cell, isolated nucleic acid molecule, expression vector, host cell, methods for making a particle of lentiviral vector, and to distribute lentiviral vector particles to invitro cells, and therapeutic or prophylactic vaccine [P] . BR112012001653A2 . 2016-11-08

机译：慢病毒载体颗粒，包膜中的假型慢病毒载体基因组，用于生产假型慢病毒载体颗粒的慢病毒载体包装系统，细胞，分离的核酸分子，表达载体，宿主细胞，制备慢病毒载体颗粒的方法以及分发慢病毒体外细胞的载体颗粒以及治疗或预防性疫苗