岩藻多糖及其组合物在缓解偏头痛中的应用

摘要

本发明涉及生物技术领域，提出了岩藻多糖及其组合物在缓解偏头痛中的应用，其中岩藻多糖的制备方法包括以下步骤：S1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液；S2、加入复合酶、甘油磷酸镁进行酶解；S3、灭酶；S4、将酶解液加入乙二醇溶液后进行离心，取上清液干燥即得岩藻多糖。其中组合物包括以下重量份组分：红枣4‑6份、岩藻多糖10‑20份、薄荷5‑8份、当归3‑5份、荞麦5‑7份、核桃1‑3份。通过上述技术方案，解决了现有技术中岩藻多糖在缓解偏头痛中的技术空白的问题。

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体的，涉及岩藻多糖及其组合物在缓解偏头痛中的应用。

背景技术

岩藻多糖又称褐藻多糖硫酸酯、褐藻多糖，是Kylin于1913年首次从海带中提取出来的，命名为Fucoidan，是一类含有L-岩藻糖和硫酸基团并含有一些单糖的水溶性天然聚合多糖。岩藻多糖的提取方法有热水浸提法、酸提法、碱提法，这些提取方法都存在时间较长，效率比较低，得率低的问题。岩藻多糖主要来源于海洋褐藻和海洋无脊椎动物，复杂的结构造就了岩藻多糖多种多样的生物学活性，逐渐开发被应用于食品和药品行业。

偏头痛是临床最常见的原发性头痛类型，常发生于偏侧，可伴随恶心、呕吐，光、声敏感等症状。而且世界卫生组织调查结果显示，偏头痛已经位列人类最常见疾病的第三名。随着当代经济的快速发展，居民生活压力增大，偏头痛的发病率也愈发增大，已经成为一种严重影响患者生活的疾病。但是将岩藻多糖应用于缓解偏头痛未见报道，因此需要开发一种将岩藻多糖应用于偏头痛的技术。

发明内容

本发明提出岩藻多糖及其组合物在缓解偏头痛中的应用，解决了相关技术中的岩藻多糖在缓解偏头痛中的技术空白的问题。

本发明的技术方案如下：

岩藻多糖在制备缓解偏头痛的组合物中的应用。

作为进一步的技术方案，所述岩藻多糖的制备方法包括以下步骤：

S1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液；

S2、加入复合酶、甘油磷酸镁进行酶解；

S3、灭酶；

S4、将酶解液加入乙二醇溶液后进行离心，取上清液干燥即得岩藻多糖。

作为进一步的技术方案，所述复合酶包括葡萄糖苷酶、α-淀粉酶、半纤维素酶，三者的质量比为1:3:6。

作为进一步的技术方案，所述步骤S1中水的质量为海带质量的9-10倍。

作为进一步的技术方案，所述步骤S2中复合酶的加入量为海带浸泡液的0.5％-1％，所述甘油磷酸镁的加入量为复合酶的50％。

作为进一步的技术方案，所述步骤S4中，乙二醇溶液的质量浓度为60％-75％。

作为进一步的技术方案，所述步骤S4中，乙二醇溶液的质量为酶解液的1-2倍。

本发明还提出含有岩藻多糖的组合物，包括以下重量份组分：红枣4-6份、岩藻多糖10-20份、薄荷5-8份、当归3-5份、荞麦5-7份、核桃1-3份。

本发明还提出一种含有岩藻多糖的组合物在制备缓解偏头痛组合物中的应用。

本发明的有益效果为：

1、本发明首次提出将岩藻多糖应用于缓解偏头痛中，岩藻多糖独特的化学结构能够促进5-羟色胺的分泌，调节降钙素基因相关肽至正常水平，将岩藻多糖应用于缓解偏头痛中，一方面能够拓宽岩藻多糖的应用范围，另一方面也给缓解偏头痛带来了新的方向。

2、本发明还提出了一种从海带中提取岩藻多糖的方法，通过复合酶的协同作用以及甘油磷酸镁的加入，促进酶解作用，提高岩藻多糖的纯度，并由于复合酶的加入能够促进中小分子的岩藻多糖的提取，更有利于人体的吸收。酶解完成后，通过乙二醇浸泡后，能够进一步提高岩藻多糖的纯度，而且本发明发现通过乙二醇处理的岩藻多糖的纯度会略高于等量的乙醇溶液。

3、本发明的方法提取得到的岩藻多糖更有利于人体的吸收，并辅以红枣，酸枣仁等药食同源的组分，各组分协同作用，大幅度改善患者的偏头痛效果，且无任何副作用，安全有效，口味清新，更符合当代年轻人的需求。

4、本发明还提供了一种缓解偏头痛的岩藻多糖组合物，以岩藻多糖为君药，补气活血、宣肝气，消瘀阻，以薄荷和当归为臣药，除外风、熄内风，以荞麦和核桃为佐药，益气力、清利头目，以红枣为使药，调和诸药，各味药协同作用，共奏疏风邪、止头痛之功。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都涉及本发明保护的范围。

实施例1

提取岩藻多糖：

S1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液，水的质量为海带质量的9倍；

S2、加入复合酶、甘油磷酸镁进行酶解，复合酶的加入量为海带浸泡液的1％，甘油磷酸镁为海带浸泡液的0.5％，复合酶包括质量比为1:3:6的葡萄糖苷酶、α-淀粉酶、半纤维素酶；

S3、灭酶；

S4、将酶解液加入浓度为75％乙二醇溶液浸泡1小时后进行离心，乙二醇溶液的质量为酶解液的1倍，取上清液干燥即得岩藻多糖，经液相测试测定岩藻多糖含量为38.5％。

实施例2

提取岩藻多糖：

S1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液，水的质量为海带质量的10倍；

S2、加入复合酶、甘油磷酸镁进行酶解，复合酶的加入量为海带浸泡液的0.5％，甘油磷酸镁为海带浸泡液的0.25％，复合酶包括质量比为1:3:6的葡萄糖苷酶、α-淀粉酶、半纤维素酶；

S3、灭酶；

S4、将酶解液加入浓度为60％乙二醇溶液浸泡1小时后进行离心，乙二醇溶液的质量为酶解液的2倍，取上清液干燥即得岩藻多糖，经液相测试测定岩藻多糖含量为41.7％。

实施例3

提取岩藻多糖：

S1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液，水的质量为海带质量的10倍；

S2、加入复合酶、甘油磷酸镁进行酶解，复合酶的加入量为海带浸泡液的1％，甘油磷酸镁为海带浸泡液的0.5％，复合酶包括质量比为1:3:6的葡萄糖苷酶、α-淀粉酶、半纤维素酶；

S3、灭酶；

S4、将酶解液加入浓度为65％乙二醇溶液浸泡1小时后进行离心，乙二醇溶液的质量为酶解液的1.5倍，取上清液干燥即得岩藻多糖，经液相测试测定岩藻多糖含量为42.1％。

实施例4

提取岩藻多糖：

S1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液，水的质量为海带质量的9倍；

S2、加入复合酶、甘油磷酸镁进行酶解，复合酶的加入量为海带浸泡液的1％，甘油磷酸镁为海带浸泡液的0.5％，复合酶包括质量比为1:9的葡萄糖苷酶、半纤维素酶；

S3、灭酶；

S4、将酶解液加入浓度为75％乙二醇溶液浸泡1小时后进行离心，乙二醇溶液的质量为酶解液的1倍，取上清液干燥即得岩藻多糖，经液相测试测定岩藻多糖含量为37.2％。

实施例5

提取岩藻多糖：

S1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液，水的质量为海带质量的9倍；

S2、加入复合酶、甘油磷酸镁进行酶解，复合酶的加入量为海带浸泡液的1％，甘油磷酸镁为海带浸泡液的0.5％，复合酶包括质量比为1:9的葡萄糖苷酶、α-淀粉酶；

S3、灭酶；

S4、将酶解液加入浓度为75％乙二醇溶液浸泡1小时后进行离心，乙二醇溶液的质量为酶解液的1倍，取上清液干燥即得岩藻多糖，经液相测试测定岩藻多糖含量为37.0％。

实施例6

提取岩藻多糖：

S1、将海带粉碎后加水溶胀得到海带浸泡液，水的质量为海带质量的9倍；

S2、加入复合酶、甘油磷酸镁进行酶解，复合酶的加入量为海带浸泡液的1％，甘油磷酸镁为海带浸泡液的0.5％，复合酶包括质量比为1:9的α-淀粉酶、葡萄糖苷酶；

S3、灭酶；

S4、将酶解液加入浓度为75％乙二醇溶液浸泡1小时后进行离心，乙二醇溶液的质量为酶解液的1倍，取上清液干燥即得岩藻多糖，经液相测试测定岩藻多糖含量为36.7％。

实施例7

将红枣5份、薄荷6份、当归4份、荞麦6份、核桃2份混合后水煎提取，然后与15份实施例3得到的岩藻多糖混合造粒得到组合物。

动物实验

健康雌性SD大鼠30只，体重190-220g，随机分成3组，每组十只。

生理盐水组：大鼠颈背部皮下注射2mL/kg生理盐水，每周1次，连续3周，于第2次注射生理盐水后进行灌胃处理，每天灌胃10mL/kg生理盐水，普通饲养；

模型组：大鼠颈背部皮下注射10mg/kg硝酸甘油注射液(浓度为5mg/mL)建模，每周1次，连续3周，于第2次硝酸甘油注射液后进行灌胃处理，每天灌胃10mL/kg生理盐水，普通饲养；

实验组：大鼠颈背部皮下注射10mg/kg硝酸甘油注射液(浓度为5mg/mL)建模，每周1次，连续3周，于第2次硝酸甘油注射液后进行灌胃处理，每天灌胃10mg/kg实施例7中组合物，普通饲养；

观察大鼠情况：当第3次大鼠皮下注射硝酸甘油注射液或生理盐水后的行为改变，记录大鼠搔头次数，前肢搔脸1次记为1次，后肢快速搔头动作从开始到停止记为1次，皮下注射硝酸甘油注射液后2h的搔头次数，判断是否建模成功。

测定CGRP、5-HT的含量：按照试剂盒进行操作。

表1动物实验结果

注：*P＜0.05(与偏头痛模型组比较)

模型组血清CGRP含量升高，与生理盐水组差异有统计学意义(P＜0.05)，实验组CGRP含量与生理盐水组差异有统计学意义。模型组5-HT与生理盐水组相比显著降低，实验组与模型组相比能够提高5-HT的含量，与模型组具有统计学意义。本发明实施例7的组合物能够降低降钙素基因相关肽，提高5-HT的含量。

人群实验

志愿者试服缓解偏头痛的案例

参考2004年国际头痛协会(HIS)ICHD-H(吴江.神经病学[M]北京:人民卫生出版社，2010:284-288)诊断标准；招募50名志愿者，男女各25名，年龄20-39岁，平均年龄28岁，均符合上述诊断标准，志愿者随水试服实施例7的组合物，每天2次，每次2g，服用28天。

试服前记录每月头痛发作频率，并记录试服期间头痛发作频率。经过计算，50名志愿者的头痛发作次数平均降低了66.7％。试服期间志愿者均无不良反应，试服结束后一个月头痛次数均没有上升。

以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。