一种大白菜茎尖冷冻切片的制备方法

摘要

本发明公开了一种大白菜茎尖冷冻切片的制备方法，涉及显微组织切片技术领域，配置10ml固定剂(75％OCT+25％无菌水)待用，准备高压灭菌镊子、刀片、无RNA酶的离心管、培养皿、包埋盒，选择长势良好的大白菜植株，将外叶切除，保留中间部分，包含长度约0.5cm的幼叶及叶原基包裹的顶端分生组织；将根部切除，保留下部2mm左右的胚轴，将此部分白菜组织浸泡在装有10ml 75％OCT的离心管中，置于冰上，抽真空10min以固定组织。本发明解决了现有技术因固定液含有乙醇导致的植物组织活性丧失的问题，同时克服了白菜组织含水量大，易形成冰晶，难以保持组织结构完整的问题，保证了样品中RNA不被降解，为大白菜茎尖组织结构观察及后续相关转录组学研究提供了强有力的保障。