一种石菖蒲的高产高品质无性繁殖技术

摘要

本发明属于无性繁殖技术领域，S1：取石菖蒲带芽茎段，对其进行消毒处理；S2：取步骤S1消毒过的石菖蒲带芽茎段接入改良NT+2，4‑D＝0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导；S3：取步骤S2诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，S4：取步骤S3增殖后的芽苗接入培养基NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6‑BA1.0mg/L中进行壮苗，S5：取步骤S4壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.1‑0.2mg/L、NAA0.1‑0.2mg/L、Ag＝5.0‑6.0mg/L中进行生根培养。具有组培苗生根率高、再生率高的效果。

说明书

技术领域

本发明属于无性繁殖技术领域，特别涉及一种石菖蒲的高产高品质无性繁殖技术。

背景技术

石菖蒲，天南星科菖蒲属植物。分布于亚洲，包括印度东北部、泰国北部、中国、韩国、日本等国。生长于海拔20米至2600米的地区，多生在山涧水石空隙中或山沟流水砾石间(有时为挺水生长)。禾草状多年生草本植物，其根茎具气味。叶全缘，排成二列，肉穗花序(佛焰花序)，花梗绿色，佛焰苞叶状，花果期2-6月。

石菖蒲有镇静作用。煎剂或挥发油均能使小鼠自发活动减少，解除单笼饲养小鼠的攻击行为；亦能延长戊巴比妥钠所致的睡眠时间，对阈下催眠剂量的戊巴比妥钠有协同作用。此外，尚能显著延长戊巴比妥钠的麻醉时间。研究表明：挥发油中的细辛醚是镇静的有效成分，但除去挥发油后仍有镇静作用，提示其镇静成分不只一种。但是由于石菖蒲的特殊生长环境与不耐阳光暴晒，否则叶片会变黄同时还不耐干旱生长特性，使其产量受到限制，因此，如何提高石菖蒲的繁殖速度为亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种石菖蒲的高产高品质无性繁殖技术，具有组培苗生根率高、再生率高的效果。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种石菖蒲的高产高品质无性繁殖技术：

S1：取石菖蒲带芽茎段，对其进行消毒处理；

S2：取步骤S1消毒过的石菖蒲带芽茎段接入改良NT+2，4-D＝0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导；

S3：取步骤S2诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，改良琼脂8g/L，pH＝5.8，光照40001x，温度22士1℃；

S4：取步骤S3增殖后的芽苗接入培养基NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BA1.0mg/L 中进行壮苗，附加蔗糖40g/L，改良琼脂8.0g/L，pH＝5.8，光照60001x，温度23士2℃；

S5：取步骤S4壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.1-0.2mg/L、NAA0.1-0.2mg/L、 Ag＝5.0-6.0mg/L中进行生根培养，生根剂1.5-3g/L，附加蔗糖15g/L，改良琼脂6.0g/L，pH＝5.8，光照80001x，温度25土2℃。

本发明的进一步设置为：所述步骤S1中的消毒处理为乙醇消毒30s后再采用0.1％HgCl

本发明的进一步设置为：所述步骤S2中腋芽的诱导条件为：在光照强度0～5001x、温度 22土2℃、湿度60～70％下培养6～8d；然后保持温度湿度不变，提高光照强度至1500～20001x，光照时间12～14h/d，继续培养12～14d。

本发明的进一步设置为：所述改良NT培养基的配方为：硝酸钾606.6mg/L、磷酸二氢铵 230.16mg/L、七水硫酸镁246.48mg/L、氯化钾3.73mg/L、硼酸1.55mg/L、硫酸锰0.34mg/L、硫酸锌0.58mg/L、钼酸钠0.11mg/L、EDTA铁钠11.17mg/L。

本发明的进一步设置为：所述改良琼脂包括：葡萄糖25g/L，酵母粉7.5g/L、蛋白胨10g/L、 Na

本发明的进一步设置为：所述生根剂包括萘乙酸、吲哚乙酸和生根粉。

本发明的有益效果是：

1、难以生根的植物用传统的繁殖方式进行繁育会使后代产生变异，还会使得植株本身的优良性状有所损失，而无性繁殖的繁殖效率高、周期短、且能保持遗传的稳定性，现无性繁殖已成为榛子繁殖的主要途径。植物组织培养主要依据植物细胞能生长成完整植株的特点，对植物器官组织等进行离体培养。

2、本发明通过培养基与激素的相互配合，能够调节植物的生长发育进程、分化方向和器官发生，改良NT培养基能够促进石菖蒲组织的发育，能够满足植物细胞的营养需要，特别适合种子发芽和幼苗生长，通常无需再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。适量的宏量和微量元素以及蔗糖，不含肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、硫胺素、甘氨酸等。

3、本发明中制备的新型培养基含有高水平的氮源、糖、维生素、生长调节素等有机添加物以及琼脂。这种培养基不仅能够支持石菖蒲的组织愈伤，还可以用来支持愈伤组织的诱导和生长、悬浮培养基中细胞的生长以及根、小苗和外植体的再生。该培养基的特点是无机盐和离子浓度较高、离子平衡稳定、硝酸盐含量高、养分的数量和比例合适、适用范围比较广，能满足植物细胞的营养和生理需要。该培养基还可用于石菖蒲的悬浮培养及转化。

具体实施方式

下面将对实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

对比例

一种石菖蒲的高产高品质无性繁殖技术，包括以下步骤：

S1：取石菖蒲带芽茎段，对其进行消毒处理；

S2：取步骤S1消毒过的石菖蒲带芽茎段接入NT+2，4-D＝0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导；

S3：取步骤S2诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH＝5.8，光照40001x，温度22士1℃；

S4：取步骤S3增殖后的芽苗接入培养基NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BA1.0mg/L 中进行壮苗，附加蔗糖40g/L，琼脂8.0g/L，pH＝5.8，光照60001x，温度23士2℃；

S5：取步骤S4壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.1-0.2mg/L、NAA0.1-0.2mg/L、 Ag＝5.0-6.0mg/L中进行生根培养，生根剂1.5-3g/L，附加蔗糖15g/L，琼脂6.0g/L，pH＝5.8，光照80001x，温度25土2℃。

实施例1：

一种石菖蒲的高产高品质无性繁殖技术，:包括以下步骤：

S1：取石菖蒲带芽茎段，对其进行消毒处理；

S2：取步骤S1消毒过的石菖蒲带芽茎段接入改良NT+2，4-D＝0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导；

S3：取步骤S2诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂8g/L，pH＝5.8，光照40001x，温度22士1℃；

S4：取步骤S3增殖后的芽苗接入培养基NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BA1.0mg/L 中进行壮苗，附加蔗糖40g/L，琼脂8.0g/L，pH＝5.8，光照60001x，温度23士2℃；

S5：取步骤S4壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.1-0.2mg/L、NAA0.1-0.2mg/L、 Ag＝5.0-6.0mg/L中进行生根培养，生根剂1.5-3g/L，附加蔗糖15g/L，琼脂6.0g/L，pH＝5.8，光照80001x，温度25土2℃。

实施例2：

一种石菖蒲的高产高品质无性繁殖技术，:包括以下步骤：

S1：取石菖蒲带芽茎段，对其进行消毒处理；

S2：取步骤S1消毒过的石菖蒲带芽茎段接入NT+2，4-D＝0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导；

S3：取步骤S2诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，改良琼脂8g/L，pH＝5.8，光照40001x，温度22士1℃；

S4：取步骤S3增殖后的芽苗接入培养基NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BA1.0mg/L 中进行壮苗，附加蔗糖40g/L，改良琼脂8.0g/L，pH＝5.8，光照60001x，温度23士2℃；

S5：取步骤S4壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.1-0.2mg/L、NAA0.1-0.2mg/L、 Ag＝5.0-6.0mg/L中进行生根培养，生根剂1.5-3g/L，附加蔗糖15g/L，改良琼脂6.0g/L，pH＝5.8，光照80001x，温度25土2℃。

实施例3：

一种石菖蒲的高产高品质无性繁殖技术，:包括以下步骤：

S1：取石菖蒲带芽茎段，对其进行消毒处理；

S2：取步骤S1消毒过的石菖蒲带芽茎段接入改良NT+2，4-D＝0.3mg/L培养基中进行腋芽的诱导；

S3：取步骤S2诱导出来的腋芽放入培养基NT+NAA0.4mg/L+IBA0.5mg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，改良琼脂8g/L，pH＝5.8，光照40001x，温度22士1℃；

S4：取步骤S3增殖后的芽苗接入培养基NT+TDZ0.02mg/L+NAA0.2mg/L+6-BA1.0mg/L 中进行壮苗，附加蔗糖40g/L，改良琼脂8.0g/L，pH＝5.8，光照60001x，温度23士2℃；

S5：取步骤S4壮苗后的芽苗接入培养基NT+AC0.1-0.2mg/L、NAA0.1-0.2mg/L、 Ag＝5.0-6.0mg/L中进行生根培养，生根剂1.5-3g/L，附加蔗糖15g/L，改良琼脂6.0g/L，pH＝5.8，光照80001x，温度25土2℃。

表1对比例与实施例中石菖蒲发育情况

从表中可以看出，实施例1、实施例2与对比例相比，实施例1和2中石菖蒲的生根率更高，生长状况更快，并且主根的根系更长，实施例3通过培养基与激素的相互配合，能够调节植物的生长发育进程、分化方向和器官发生，改良NT培养基能够促进石菖蒲组织的发育，能够满足植物细胞的营养需要，特别适合种子发芽和幼苗生长，具有组培苗生根率高、再生率高的效果。