hoxaa基因簇缺失斑马鱼突变体的制备方法和应用

摘要

本发明公开了hoxaa基因簇缺失斑马鱼突变体的制备方法和应用，依次包括设计gRNA位点—PCR扩增—gRNA的模板纯化—体外转录—gRNA纯化—显微注射—检测敲除效率—饲养至成鱼—与野生型交配—检测下一代胚胎是否携带突变位点—饲养成年后剪尾鉴定出杂合突变体—两杂合体交配得到纯合突变体的步骤。本发明首次运用CRISPR技术删除基因组中hoxaa基因簇长片段构建hoxaa基因簇缺失的斑马鱼突变体，其可用于与hoxaa基因簇相关疾病的动物模型研究hoxa基因在动物体生长发育的调节机制和基因缺失引起的相关疾病治疗。