涡旋混匀法纠正EDTA依赖性假性血小板减少的方法

摘要

本发明提供了涡旋混匀法纠正EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA‑PTCP)的方法，属于血液细胞检测技术领域。本发明改变以往基于患者二次采血更换抗凝剂的化学方法纠正EDTA‑PTCP，采用物理学方法涡旋混匀纠正EDTA‑PTCP原标本，患者无需二次采血，在保证血小板解聚的同时并保持原血样中红细胞、白细胞不受影响，现有的数据发现89.68％的EDTA‑PTCP可以被有效纠正。该方法在大批量临床检测中具有很高的应用价值，并且能快速纠正假性减少的血小板值，适合广泛推广。

说明书

技术领域

本发明涉及一种快速、安全纠正EDTA依赖性假性血小板减少的方法，属于 血液细胞检测技术领域。

背景技术

血常规检测作为健康筛查、入院体检、疾病进程、康复治疗等诸多领域发挥 着重要作用，在标本采集过程中国际血液学标准化委员会推荐使用乙二胺四乙酸 盐(EDTA)作为血常规检测的抗凝剂，但部分患者应用EDTA抗凝血常规检测 时发生EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA-PTCP)；综合性医院检验专业面对 血常规标本量巨大的工作量，其中EDTA-PTCP标本约占每日总量的的0.5％，目 前血常规仪器无法识别这类血小板假性减少，结果审核过程中需要经验丰富的检 验人员通过仔细辨认血小板直方图将血小板假性减少标本挑选出来，还需要通过 血涂片，显微镜检查出现血小板聚集才能最终被确定为EDTA-PTCP，其检出流 程复杂，但意义重大，避免血小板假性减低结果报出，导致临床误诊或非必要的血小板输入、骨髓穿刺以及用药治疗。

现有技术多数基于患者二次采血时更换抗凝剂、添加药物或机旁采血，操作 复杂并且患者二次采血既增加经济负担又增添痛苦；因此简单、方便、快速、经 济且避免患者再次采血的解决方案是目前急需的。

随着检验技术及器材的发展，利用新的器材等分析方法，找到可以更简单、 方便、快速、经济的方法解决EDTA-PTCP。涡旋混匀仪是较为常用的一种混匀 试剂等液体的电动仪器。目前导致血小板的假性聚集的原因倾向于血小板卫星现 象、抗磷脂抗体以及DTA-PTCP血小板的GPⅡb//Ⅲa表达明显增强等理论，此种 血小板假性聚集是可逆的，本专利采用物理涡旋混匀方式，破坏各血小板之间 的非共价键结构联系，达到解聚效果，减少采血耗材及检验试剂的消耗，提高经 济效益，患者免于重新采血的痛苦，减少临床就诊等待时间，加快门诊就诊周 转率，减轻护士重复采血工作量；减少临床误诊或非必要的血小板输入、骨髓 穿刺以及用药治疗。

发明内容

本发明的目的是为了解决上述现有方法技术存在的问题，进而提供一种简 单、方便、快速、经济且避免患者再次采血纠正EDTA-PTCP的解决方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

涡旋混匀法纠正EDTA依赖性假性血小板减少的方法，具体步骤为：

S1，在大量临床检测过程中，筛选出血小板≤90×10

S2，对EDTA-PTCP标本组分别进行低、中、高不同转速及不同时间 的涡旋混匀处理，并检测血小板数值；

S3，步骤1中筛选出的EDTA-PTCP标本组的受检者，更换枸橼酸钠抗 凝剂采血管重新采血检测，此次测得的血小板计数为其解聚值；对于不 同混匀转速和时间处理所测得的血小板计数，与更正抗凝剂后测得血小 板数值相比较，最先达到纠正值则为筛选最佳混匀效果，将最佳混匀效 果的结果应用到临床。

本发明涡旋混匀法纠正EDTA依赖性假性血小板减少的方法，步骤S2 中，对EDTA-PTCP标本进行不同涡旋转速及时间的处理，步骤包括：

S2-1，根据首次检测血小板数值，对EDTA-PTCP标本组分为A、B两 组，A组PLT≤60×10

S2-2，每份标本均采用涡旋混匀仪进行混匀，设定n个转速，由此得 到了2n个模块组；

S2-3，选取不同的混匀时长，分别记录不同时间下的血小板数值。

本发明涡旋混匀法纠正EDTA依赖性假性血小板减少的方法，步骤S3 中，筛选最佳混匀效果具体为：

S3-1，所得EDTA-PTCP标本告知受检者，更换枸橼酸钠抗凝剂采血 管重新采血检测，此次测得的血小板计数为其解聚值；对于2n个模块组 在不同时间处理所测得的血小板计数，与更正抗凝剂后测得血小板数值 相比较，最先达到纠正值则为最佳混匀时间，得到2n个最佳解聚效果；

S3-2，将2n个最佳解聚效果直接应用到临床中，对EDTA-PTCP标本 进行筛选确定A或B组，在2n个模块中，选取最佳解聚效果的涡旋混匀转数及 时间，快速检测血小板数值。

本发明利用涡旋混匀法纠正EDTA依赖性假性血小板减少的方法，新的器材等 分析方法，找到可以用于更简单、方便、快速、经济的方法解决EDTA-PTCP， 减少采血耗材及检验试剂的消耗，提高经济效益，患者免于重新采血的痛苦，减 少临床就诊等待时间，加快门诊就诊周转率，减轻护士重复采血工作量，具有很 高的实用价值，并且操作简单适于推广。

具体实施方式

下面将对本发明做进一步的详细说明：本实施例在以本发明技术方案为前提下进行 实施，给出了详细的实施方式，但本发明的保护范围不限于下述实施例。

实施例一：本实施例所涉及的涡旋混匀法纠正EDTA依赖性假性血小板减少 的方法，包括：

S1，在大量临床检测过程中，筛选出EDTA-PTCP标本。根据筛选标 准：血小板减少(PLT≤90×10

S2，对EDTA-PTCP标本分别进行低、中、高不同转速及不同时间的 涡旋混匀处理，并检测血小板数值；

在步骤S2中，对EDTA-PTCP标本进行不同涡旋转速及时间的处理：

S2-1，根据首次检测血小板数值，对10例EDTA-PTCP标本进行分组，A 组PLT≤60×10

表1：EDTA-PTCP标本分组

S2-2，每份标本均采用涡旋混匀仪进行混匀，转速设定为500r/min、 1500r/min、3000r/min，由此得到了6个模块组；

S2-3，选取7个混匀时长，包括：30s、1min、2min、3min、5min、 7min、10min混匀时长处理(如表2)；

表2：A、B两组标本经不同转速-时间处理后Plt计数

在步骤S3中对于不同混匀转速和时间处理筛选最佳混匀效果：

S3-1，所得EDTA-PTCP标本告知受检者，更换枸橼酸钠抗凝剂重新采 血检测，初始采血使用的是常规的EDTA采血管，此次测得的血小板计数 为其解聚值(如表3)；对于不同混匀转速和时间处理所测得的血小板计 数，与更正抗凝剂后测得血小板数值相比较，最先达到纠正值则为最佳 混匀时间，每组不同转速的最佳混匀时间均值，则为最佳解聚效果(如 表4)。

表3：EDTA-PTCP标本解聚值

表4：最佳解聚效果

S3-2，对于A组(PLT≤60×109/L)标本，转速500r/min，3.8min； 转速1500r/min，4.4min；转速3000r/min，2.3min。

S3-3，对于B组(PLT＞60×109/L)标本，转速500r/min，3.6min； 转速为1500r/min，2.5min；转速3000r/min，2min。

本实施例仅给出了10例标本作为示例，若想得到更加精确的最佳解 聚时间，可以通过设定多个不同的转速与时间，采用数量更多的样本实 施得到更加精确的结论。申请人在临床中对遇到的所有存在EDTA依赖性 假性血小板减少的标本都进行了此方法，实验证明98.6％有效果的，证明 本方法适用于存在EDTA依赖性假性血小板减少的标本中，可以应用到临 床推广使用。

所以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，这些具体实施方式都是基于 本发明整体构思下的不同实现方式，而且本发明的保护范围并不局限于此，任何 熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替 换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要 求书的保护范围为准。