一种阴道分泌物有形成分的染色液及其制备方法

摘要

一种阴道分泌物有形成分的染色液及其制备方法，涉及细胞染色技术领域；阴道分泌物有形成分的染色液，以乙醇和缓冲液为溶剂，包括如下浓度的组分：红色碱性染料5‑15g/L，蓝色碱性染料3‑10g/L，甘氨酸0.1‑1g/L，葡萄糖0.5‑2g/L，吐温0.5‑3ml/L。本发明的一种阴道分泌物有形成分的染色液，其可将阴道分泌物有形物质进行染色和快速区分，并通过仪器直接读取结果，极大地缩减了时间及人力的成本。

说明书

技术领域

本发明属于细胞染色技术领域，具体涉及用于一种阴道分泌物有形成分的染色液及其制备方法。

背景技术

染色液可针对于阴道微生态有形成分进行染色，在自动化仪器识别的条件下对妇科疾病起到更高效的检测作用。

在显微镜下特征，真菌阳性：孢子形状为瓜子样或芝麻点状，大小可能不一，可能存在芽生孢子，表现为珠串状样。假菌丝，呈分枝状和链状。滴虫：阴道毛滴虫是一种极微小有鞭毛的原虫生物，呈梨形，梭形、椭圆形或者枣核形形态，大小和中性粒细胞相同，形态不规则。加德纳菌：一般是由加德纳菌感染阴道上皮细胞，使其周围呈锯齿样结构，在细胞边缘贴附大量的颗粒状物，提示细菌性阴道病。乳酸杆菌表现为粗杆状。

现有的针对于妇科染液的染色种类有革兰氏染色、瑞-姬姆萨染色等染色方法，但都需要的时间长且需要专业的人士进行操作。

因此，有必要研发的一种阴道微生态有形成分染色液是和仪器匹配使用，以缩短所需的处理时间和人力的成本。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种阴道分泌物有形成分的染色液，其可将阴道分泌物有形物质进行染色和快速区分，并通过仪器直接读取结果，极大地缩减了时间及人力的成本。

本发明的目的之二在于提供一种阴道分泌物有形成分的染色液的制备方法，制备方法简单。

本发明的目的之一采用如下技术方案实现：

阴道分泌物有形成分的染色液，以乙醇和缓冲液为溶剂，包括如下浓度的组分：红色碱性染料5-15g/L，蓝色碱性染料3-10g/L，甘氨酸0.1-1g/L，葡萄糖0.5-2g/L，吐温0.5-3ml/L。

进一步地，包括如下浓度的组分：红色碱性染料8-12g/L，蓝色碱性染料5-7g/L，甘氨酸0.3-0.8g/L，葡萄糖0.8-1.2g/L，吐温1-2ml/L。

进一步地，所述乙醇和缓冲液的体积比为1-2：8-9。

进一步地，所述红色碱性染料为藏红T、中性红和甲基红中的任一种或两种以上。

进一步地，所述蓝色碱性染料为天青Ⅱ、亚甲基蓝和甲苯胺蓝中的任一种或两种以上。

进一步地，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，pH值为7-7.8。

进一步地，包括如下浓度的组分：中性红10g/L，亚甲基蓝6g/L，甘氨酸0.5g/L，葡萄糖1g/L，吐温2ml/L。

本发明的目的之二采用如下技术方案实现：

一种阴道分泌物有形成分的染色液的制备方法，包括以下步骤：按照配方量将红色碱性染料、蓝色碱性染料、乙醇加入缓冲液中混合均匀，静置后，加入甘氨酸、葡萄糖和吐温混合均匀，得到所述阴道分泌物有形成分的染色液。

进一步地，制备过程中的温度为15-30℃，静置时间为10-15h。

相比现有技术，本发明的有益效果在于：

本发明的一种阴道分泌物有形成分的染色液，包括红色碱性染料、蓝色碱性染料、甘氨酸、葡萄糖、吐温、乙醇和缓冲液；细胞核的主要成分是脱氧核糖核酸，脱氧核糖核酸的磷酸基团朝向外测，带负电荷，容易与戴正电荷的碱性染料结合，从而使细胞核染色；细胞核颜色的深浅与脱氧核糖核酸的致密程度呈正比；本发明的红色碱性染料、蓝色碱性染料可对阴道分泌物有形物质的细胞核和细胞质进行选择性染色，从而对各种细胞快速区分；同时缓冲液可维持细胞的活性，甘氨酸和葡萄糖可保护细胞形态，乙醇可改善染色液中各组分的溶解性和分散性。通过各组分的协同作用，实现阴道分泌物有形物质的快速区分，并通过仪器直接读取结果，极大地缩减了时间及人力的成本。

本发明的一种阴道分泌物有形成分的染色液的制备方法，制备工艺简单，得到的产品的稳定性高。

附图说明

图1为本发明的染色液处理的白细胞的染色效果图。

图2为本发明的染色液处理的加德纳菌的染色效果图。

图3为本发明的染色液处理的滴虫的染色效果图。

图4为本发明的染色液处理的上皮细胞与白细胞的染色效果图。

图5为本发明的染色液处理的菌丝的染色效果图。

图6为本发明的染色液处理的芽孢和孢子的染色效果图。

图7为本发明的染色液处理的乳酸杆菌的染色效果图。

具体实施方式

下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。

实施例1

一种阴道分泌物有形成分的染色液，包括如下组分：红色碱性染料1g，蓝色碱性染料0.6g，甘氨酸0.05g，葡萄糖0.1g，吐温0.2ml，乙醇15mL，缓冲液85mL。

进一步地，所述红色碱性染料为中性红；所述蓝色碱性染料为亚甲基蓝；所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，pH值为7.4。

一种阴道分泌物有形成分的染色液的制备方法，包括以下步骤：按照配方量将红色碱性染料、蓝色碱性染料和乙醇加入缓冲液中混合均匀，温度为25℃，静置12h后，加入甘氨酸、葡萄糖和吐温混合均匀，得到所述阴道分泌物有形成分的染色液。

实施例2

一种阴道分泌物有形成分的染色液，包括如下组分：红色碱性染料0.8g，蓝色碱性染料0.5g，甘氨酸0.03g，葡萄糖0.08g，吐温0.12ml，乙醇10mL，缓冲液90mL。

进一步地，所述红色碱性染料为中性红；所述蓝色碱性染料为质量比1:1的天青II和亚甲基蓝；所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，pH值为7.8。

一种阴道分泌物有形成分的染色液的制备方法，包括以下步骤：按照配方量将红色碱性染料、蓝色碱性染料和乙醇加入缓冲液中混合均匀，温度为20℃，静置10h后，加入甘氨酸、葡萄糖和吐温混合均匀，得到所述阴道分泌物有形成分的染色液。

实施例3

一种阴道分泌物有形成分的染色液，包括如下组分：红色碱性染料1.2g，蓝色碱性染料0.7g，甘氨酸0.08g，葡萄糖0.12g，吐温0.15ml，乙醇20mL，缓冲液80mL。

进一步地，所述红色碱性染料为中性红；所述蓝色碱性染料为亚甲基蓝；所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，pH值为7.2。

一种阴道分泌物有形成分的染色液的制备方法，包括以下步骤：按照配方量将红色碱性染料、蓝色碱性染料和乙醇加入缓冲液中混合均匀，温度为30℃，静置15h后，加入甘氨酸、葡萄糖和吐温混合均匀，得到所述阴道分泌物有形成分的染色液。

性能测试

本发明的阴道分泌物有形成分的染色液的染色性能测试，包括以下步骤：

1、采样：用灭菌拭子从阴道后穹窿处取阴道分泌物，将棉签插入阴道中，旋转20秒(或在阴道壁上滚动2-3周)，确保采样拭子整个外周都接触过阴道壁；小心地把棉签取出来，得到待测样本。

2、检测：将待测样本与实施例1的染液充分混合后，利用AI识别系统通过显微镜下观察细胞形态。

3、结果：如图1-7所示。

如图1-7所示，本发明的阴道分泌物有形成分的染色液可对上皮细胞、白细胞、加德纳菌、阴道滴虫、菌丝、芽孢和孢子和乳酸杆菌进行染色，结构清晰，易于识别，可快速区分，并通过仪器直接读取结果，2-3分钟即可完成快速染色，极大地缩减了时间及人力的成本。

上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。