一种治疗女性外阴白斑的缓释型抗菌凝胶及其制备方法

摘要

本发明提供一种治疗女性外阴白斑的缓释型抗菌凝胶及其制备方法，涉及医用抗菌凝胶加工技术领域。所述缓释型抗菌凝胶包括水凝胶材料和负载药物的微球复合组成，所述水凝胶材料为氧化改性的羟丙基羧甲基纤维素和改性壳聚糖混合获得，而负载药物的微球为羧甲基壳聚糖负载有效药物成分后制备得到。本发明克服了现有技术的不足，采用凝胶微珠混合有效药物成分再用水凝胶包裹制备药物释放体系，有效达到药物缓释的目的，保证药物的长期疗效的同时降低毒副反应，并且保护患处的生理环境，提升使用的舒适度。

说明书

技术领域

本发明涉及医用抗菌凝胶加工技术领域，具体涉及一种治疗女性外阴白斑的缓释型抗菌凝胶及其制备方法。

背景技术

外阴营养不良又称外阴白色病变、外阴上皮内非瘤样病变、外阴白斑等，是女性外阴皮肤和粘膜组织发生变性及色素改变的一种慢性病、常见病，其病程长，难治愈，易复发，且外阴营养不良发病机制至今未明。

现阶段临床上对外阴白斑的治疗方法包括药物治疗、超声治疗、微波治疗、高压氧治疗、激光治疗、温针灸治疗、手术治疗等。而考虑治疗的舒适度、便捷性和治疗的安全性大多患者会选择药物治疗，一般治疗外阴白斑的药物有糖皮质激素、免疫调节剂、抗肿瘤药物、性激素及中药等，一般这类药物大多是以药膏或者洗剂的方式对患处进行治疗。

由于洗剂大多是在清洗时将药物接触患部，药物停留时间短，往往会采用高浓度药物直接达成给药目的，起到杀菌治疗的目的，且一般使用的方式为一日多次，治疗过程较为繁琐，而采用药膏直接涂抹式治疗则相对便捷，但是由于药膏的特性和患者生理结构的特性，一般的药膏在长时间涂抹后会对生殖道环境、黏膜自身分泌功能产生破坏，从而导致生殖道局部免疫力的下降，且对人体有创伤，破坏宫颈分泌功能，致使阴道抵抗力下降，严重影响性生活及生殖健康。

针对上述问题现阶段大多采用水凝胶这类材质来配合有效药物成分对患处进行治疗，其中水凝胶具有良好的生物相容性、生物降解性和低毒性，但是这类材质在使用时药物的释放系统则是直接快速的将有效成分释放对患处进行治疗处理，然而许多药物使用一段时间后会产生较大的副作用，且会使患者产生抗药性，降低药物的治疗效果，给实际的临床治疗带来一定的困扰。

发明内容

针对现有技术不足，本发明提供一种治疗女性外阴白斑的缓释型抗菌凝胶及其制备方法，采用凝胶微珠混合有效药物成分再用水凝胶包裹制备药物释放体系，有效达到药物缓释的目的，保证药物的长期疗效的同时降低毒副反应，并且保护患处的生理环境，提升使用的舒适度。

为实现以上目的，本发明的技术方案通过以下技术方案予以实现：

一种治疗女性外阴白斑的缓释型抗菌凝胶，所述缓释型抗菌凝胶包括水凝胶材料和负载药物的微球复合组成，所述水凝胶材料为氧化改性的羟丙基羧甲基纤维素和改性壳聚糖混合获得，而负载药物的微球为羧甲基壳聚糖负载有效药物成分后制备得到。

优选的，所述负载药物的微球占水凝胶材料含量的20％-40％。

优选的，所述有效药物成分包括治疗外阴白斑的糖皮质激素、免疫调节剂、性激素等能应用于治疗外阴白斑的成分中的任意一种或多种组合。

所述缓释型抗菌凝胶的制备方法包括以下步骤：

(1)氧化羟丙基羧甲基纤维素的制备：将羟丙基羧甲基纤维素通过高碘酸钠溶液进行氧化改性，得氧化羟丙基羧甲基纤维素备用；

(2)改性壳聚糖制备：将壳聚糖混合磺酸甜菜碱进行改性，得改性壳聚糖备用；

(3)水凝胶制备：将上述氧化羟丙基羧甲基纤维素和改性壳聚糖混合后加入去离子水，常温搅拌溶解，得水凝胶备用；

(4)有效药物的处理：将治疗外阴白斑的有效药物成份加入去离子水和三聚磷酸钠进行超声处理得混合乳液备用；

(5)微球制备：将羧甲基壳聚糖混合聚乙烯醇后再与上述混合乳液混合得混合液，并在混合液中加入银离子溶液和纳米氧化锌，持续搅拌沉淀后分离，将沉淀冻干后得微球备用；

(6)抗菌凝胶制备：将上述微球置于步骤(3)中的水凝胶中混合搅拌均匀，得抗菌凝胶。

优选的，所述步骤(1)中氧化改性的具体方式为：配置浓度为10％的羟丙基羧甲基纤维素溶液，避光按照羟丙基羧甲基纤维素溶液∶高碘酸钠溶液∶乙二醇＝5∶1∶6的体积比混合搅拌均匀，再采用蒸馏水透析3d，后冻干得氧化羟丙基羧甲基纤维素。

优选的，所述步骤(2)中改性的具体方式为：壳聚糖混合2％的醋酸水溶液，制备得浓度为0.1mol/L的壳聚糖溶液，后加入等摩尔的磺酸甜菜碱，90℃反应24h，再沉淀洗涤后冻干，得改性壳聚糖。

优选的，所述步骤(3)所制得的水凝胶中氧化羟丙基羧甲基纤维素和改性壳聚糖混合的含量为2％和3％。

优选的，所述步骤(4)中所得混合乳液中有效药物成份的含量为1％。

优选的，所述步骤(5)微球制备过程中羧甲基壳聚糖、聚乙烯醇和混合乳液混合的体积比为2∶2∶1，且选用聚乙烯醇的浓度为3％。

优选的，所述步骤(5)中混合液、银离子溶液和纳米氧化锌的质量比为10∶1∶0.3，且银离子溶液中银离子的浓度为0.1mol/L。

本发明提供一种治疗女性外阴白斑的缓释型抗菌凝胶及其制备方法，与现有技术相比优点在于：

(1)本发明采用水凝胶微球复配有效药物成分形成缓释的给药系统，能够在混合水凝胶系统后，持续缓慢的对患处进行给药治疗，防止药物浓度过高对患处产生刺激，同时有效防止药物产生的毒副作用，提升治疗效果；

(2)本发明采用乳化交联的方式对羧甲基壳聚糖制备凝胶微球，在制备过程中羧甲基壳聚糖通过配位键螯合与金属离子络合形成水凝胶，能够有效结合有效药物成分，后期形成水凝胶微球对药物起到良好的包覆结合效果，在干燥后的水凝胶微球混合其余成分的水凝胶在涂覆患处时与患处具有良好的生物相容性，有效的在涂覆后微球后药物缓慢释放，达到均匀缓释的给药过程，保证患处药物的浓度，防止给药时药物浓度过高或过低的给药不均匀的问题，有效降低药物的毒副性，防止人体对药物产生抗性，提升药物的作用效果和作用时间。

(3)本发明采用氧化改性的羟丙基羧甲基纤维素和磺酸甜菜碱改性的壳聚糖作为水凝胶的制备材料有效提升水凝胶的生物相容性和溶胀性，同时提升使用的舒适度，协同水凝胶微珠建立良好的药物缓释系统，并且具有良好的协同灭菌效果，达到良好的杀菌止痒效果，保证患处的生理平衡，提升治疗效果。

附图说明：

图1为本发明不同浓度微球含量的抗菌水凝胶在不同温度下的成胶速度示意图；

图2为本发明为本发明抗菌水凝胶不同接触时间对金黄色葡萄球菌的灭菌效果示意图；

图3为本发明为本发明抗菌水凝胶不同接触时间对大肠杆菌的灭菌效果示意图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：

水凝胶原料制备：

(1)将适量的羟丙基羧甲基纤维素混合蒸馏水搅拌均匀后得质量浓度10％的羟丙基羧甲基纤维素溶液；

(2)将上述羟丙基羧甲基纤维素溶液与高碘酸钠溶液按照体积比5∶1进行混合均匀，得混合液；

(3)将上述混合液在避光环境中加入等体积的乙二醇，混合搅拌均匀，再采用蒸馏水透析3d，后零下50℃低温冻干得氧化羟丙基羧甲基纤维；

(4)将适量的壳聚糖于2％的醋酸水溶液中进行搅拌溶解，制得0.1mol/L的壳聚糖溶液；

(5)将上述壳聚糖溶液加入等摩尔的磺酸甜菜碱，水浴加热至90℃后混合反应24h，后蒸发除去部分溶剂再混合丙酮溶液进行絮凝沉淀，得沉淀物洗涤后于零下50℃低温冻干得改性壳聚糖；

(6)将上述改性壳聚糖、氧化羟丙基羧甲基纤维和去离子水按照质量比3∶2∶95进行常温混合搅拌均匀，得水凝胶。

实施例2：

(实际制备过程中有效药物的选择根据实际临床需要确定，这里采用氢化可的松为实验检测药物)

负载水凝胶微球的制备：

(1)有效成分的处理：将丁酸氢化可的松作为有效药物成分，后加入去离子水和三聚磷酸钠超声混合，制备成有效药物成分浓度为1％、三聚磷酸钠浓度为5％的混合乳液；

(2)将羧甲基壳聚糖、上述混合乳液和浓度为3％的聚乙烯醇按照体积比2∶2∶1混合均匀，得混合液；

(3)将纳米氧化锌加入上述混合液中后边搅拌边加入银离子的浓度为0.1mol/L的银离子溶液，且纳米氧化锌、混合液、银离子溶液的质量比为0.3∶1∶10，持续搅拌后分离沉淀后洗涤，再将沉淀于零下50℃低温冻干，得负载药物的水凝胶微球。

实施例3：

抗菌凝胶的制备：

将上述实施例2中的负载药物的水凝胶微球按照20％、30％、40％的添加比例添加至实施例1中水凝胶中，充分混合搅拌均匀得抗菌凝胶。

检测：

1、检测上述实施例3中抗菌凝胶在不同温度下的成胶时间：

成胶时间：将上述实施例3中添加不同分量的水凝胶微球的抗菌水凝胶吸取20ml至敞口玻璃瓶中，在不同温度下放置，当玻璃瓶晃动时瓶内溶液肉眼观察物流动性时即为成胶，具体结果如下表1和图1所示：

表1

由上表可知所述的抗菌水凝胶在接近人体温度时能够较为快速的形成凝胶质地，便于药物在实际使用时的涂抹和封闭，防止细菌的过度感染。

2、按照上述实施例2的步骤去除药物成分，制备不含有效药物成分的水凝胶微球，将上述不含有效药物成分的水凝胶微球按照(20％、30％、40％的添加量与实施例1中的水凝胶混合，制备无药物抗菌凝胶，检测无药物抗菌凝胶的抗菌性能：

选取金黄色葡萄球菌(ATCC 6538，革兰氏阳性菌)、大肠杆菌(ATCC 43895，革兰氏阴性菌)为试验菌种，将各组无药物抗菌凝胶涂覆在2.54cm×2.54cm大小的平板上成胶后干燥成膜状，后灭菌，在膜中心滴加25μL的预先培养好的细菌悬浮液(其中金黄色葡萄球菌的浓度为2.33×10

表2

由上表可知，本发明中的水凝胶和微球本身均具有良好的灭菌效果，且在微球含量越高的情况下灭菌效果也越好，(微球中含有壳聚糖成分和银离子，均具有良好的灭菌效果)。

3、根据上述实施例1-3制得水凝胶微球含量为10％、20％、30％、40％、50％的抗菌水凝胶作为实验组，并选取市场上的丁酸氢化可的松乳膏作为对比组(选用尤卓尔丁酸氢化可的松乳膏，其中酸氢化可的松含量为0.1％)，以生理盐水做空白对照组进行皮肤刺激性试验：

采用实验用成年白色家兔，观察不同水凝胶微球添加量的抗菌水凝胶进行多次给药的皮肤刺激性：

将成年家兔剃去背部两侧左右各5cm×5cm范围的兔毛，将去毛部位中央标记3cm×3cm范围为给药区，适宜环境饲养48h，选择剃毛处无红斑水肿的家兔用于检测；

选取七组剃毛家兔，其中每组三只，将每组家兔的一侧给药区每隔8h采用实验组、对比组的产品涂抹1g的量，另一侧采用生理盐水涂抹，且每次给药前先将给药区采用温水清洁干净，连续给药72h，观察各组家兔的给药部位的情况，具体如下表3所示：

表3

由上表可知，本发明所制得的抗菌水凝胶基本对皮肤无刺激性，且还能缓解药物成分(丁酸氢化可的松)对皮肤的刺激性，达到良好的舒缓效果。

4、临床检测本发明水凝胶微球含量为30％的抗菌水凝胶与市场上的丁酸氢化可的松乳膏作为对比组(选用尤卓尔丁酸氢化可的松乳膏，其中酸氢化可的松含量为0.1％)对外阴白斑的治疗缓交效果对比：

选取2019年4月-2019年11月病理检查确诊外阴营养不良患者172例，其中年龄范围为36-67岁，平均年龄在52岁，其中鳞状上皮增生型37例，硬化苔藓型12例，混合型123例，以上患者均排除其它病变，将上述172例患者随机分为对照组(尤卓尔丁酸氢化可的松乳膏治疗)和治疗组(抗菌水凝胶治疗)，其中分组结果如下表4：

表4

治疗方法为采用各组药物，早晚各清洁后涂覆患处，3周为一个疗程，四个疗程后对患者进行随访并复诊，根据患者连用四个疗程复诊时的瘙痒症状、和皮肤体征的变化、外阴皮肤组织镜下结构变化情况，作为疗效评定指标。

(治愈：瘙痒完全消失，患处皮肤黏膜呈现正常颜色，黏膜变软且皮肤恢复弹性；缓解：瘙痒症状得到控制，患处皮肤相较于治疗前颜色和弹性更接近正常；无效：仍然有瘙痒症状，患处基本无改变)

四个疗程后对照组和治疗组的治疗情况如下表5所示：

表5

由上表可知治疗组所达到的疗效优于对照组，且在随访过程中，对照组有三名患者在治疗一周后无效转用其它药物，治疗组有一名患者在治疗两周后无效转用其它药，且对照组有12名患者表示第三、四疗程的治疗效果没有第一、二疗程的治疗效果好，而治疗组并没有此类反馈。

综上所述，本发明制备的抗菌凝胶能够有效结合相应的药物来治疗外阴白斑，同时相较于同类型的药物成分具有更佳良好的治疗效果。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。