一种儿童纤毛不动综合征气管类器官的培养液和培养方法

摘要

本发明提供了一种儿童气管类器官的培养液和培养方法，培养液是含有如下各终浓度的组分的Advanced DMEM/F12培养基：GlutaMax‑I添加剂1×、B27添加剂1×、HEPES缓冲液1×、青霉素‑链霉素双抗溶液1×、烟酰胺3～5mM、N‑乙酰基‑L‑半胱氨酸1～1.5mM、Y‑27632 4～6μm、SB202190 400～600nm、A83‑01 400～600nm、R‑Spondin1 400～600ng/ml、FGF7 20～30ng/ml、FGF10 90～110ng/ml、Noggin 90～110ng/ml、EGF 1～10ng/ml。本发明方法使用少量的气管上皮组织，即可培养出成形率高、体积大的气管类器官，成功率高，培养周期短，基于培养得到的类器官从基因、蛋白以及结构功能方面系统评估儿童PCD患者气管上皮中纤毛细胞及纤毛摆动状态，可完成对患者纤毛基因、结构及功能的全方位评估，相比于目前需要多次活检取样原位细胞的PCD诊疗手段，极大地降低了有创操作次数，减少了疾病负担。