一种在Raw264.7细胞中快速构建稳定高表达细胞株的方法

摘要

一种在Raw264.7细胞中快速构建稳定高表达细胞株的方法：将质粒转化到感受态DH5α；对转化后的DH5α扩大培养，提取质粒；将转后的大肠杆菌进行质粒提取，获得将目的基因与载体连接，转化到感受态DH5α；对转化后的DH5α扩大培养，提取质粒；将获得的质粒转染293T细胞，获得慢病毒液；利用PTG8000浓缩病毒液的方法浓缩病毒液；利用电转仪通过电转的方式将浓缩病毒转入Raw264.7细胞；稳定表达细胞的筛选；细胞扩增；获得稳定高表达目的基因的Raw264.7细胞株。本发明利用电转仪解决了Raw264.7细胞难感染，难以构建稳定高表达细胞株的问题，操作简便，可以在短时间内获得稳定高表达某基因的Raw264.7细胞株。