一种吡咯烷类整合素调节剂及其用途

摘要

本发明涉及一种式I所示的吡咯烷类整合素调节剂化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，以及包含其的药物组合物，其制备方法，及其医药用途，所述式I结构如下：

说明书

本申请要求2020年7月29日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202010747225.9，发明名称为“一种吡咯烷类整合素调节剂及其用途”的在先申请的优先权。所述申请的全文通过引用的方式结合于本申请中。

技术领域

本发明属于药物化合物领域，具体涉及一种吡咯烷类整合素调节剂及其用途。

背景技术

整合素家族是一类分布广泛的跨膜糖蛋白，是连接细胞外基质环境与细胞内信号传导的纽带。整合素由α亚单位和β亚单位通过非共价键连接成异二聚体，目前已发现18种α亚基和8种β亚基，可组合成至少24种整合素二聚体。作为跨膜蛋白，细胞黏附分子整合素家族是细胞外基质、炎症细胞、成纤维细胞和实质细胞之间的主要连接物质，与组织纤维化的发生、维持和发展密切相关，在组织细胞纤维化过程中介导许多关键的细胞-细胞和细胞-细胞外基质相互作用。(Manninen et al,Proteomics,2017,17(3-4):1600022.)。

在整合素家族中，αV家族主要参与机体组织的纤维化进程。整合素αV家族包括5种亚型(αVβ1、αVβ3、αVβ5、αVβ6、αVβ8)，在多种组织的正常细胞中低表达，而在纤维性组织细胞中高表达。TGF-β是参与组织纤维化形成的重要因子，尤其是TGF-β1。在炎症和纤维化中，TGF-β1参与生理修复和胶原蛋白的积累。它可以促进上皮细胞和间质细胞的胶原和纤维连接素的生成，导致在创伤修复和纤维化过程中细胞外基质(ECM)积累(Weiskirchen et al,Molecular aspects of medicine,2019,65:2.)。整合素αV家族蛋白参与激活潜藏的TGF-β分子，通过活化TGF-β诱导过度的自身免疫反应和炎症反应，促进组织纤维化进程。

不同亚型的整合素参与机体不同部位的纤维化进展，在肾组织和肺组织纤维化中αvβ6及αvβ1发挥主要作用，在心脏纤维化中αvβ3/5较常见，而在肝纤维化中αvβ1占主导作用。整合素αvβ1是一种低亲和力的纤连蛋白受体，在基底上皮细胞中高表达，具有促进角化细胞在底层纤维连接蛋白EDA上迁移的作用。阻断整合素αvβ1与TGF-β1相互作用有助于抑制TGF-β1活性，阻断纤维化进程。此外整合素αvβ1通过激活潜伏的TGFβ1，还可参与牙龈成纤维细胞的合成(Jakhu et al,Journal of oral biology and craniofacial research,2018,8(2):122.)。在众多αv家组蛋白中，针对αvβ6的研究较为深入。有报道称，在正常的肺组织中整合素αvβ6表达量很低，但是当肺损伤发生炎症和纤维化时，αvβ6快速高表达(Hatley et al,Angewandte Chemie International Edition,2018,57(13):3298.)。在患有原发性胆汁性肝硬化(PBC)、酒精性脂肪肝、乙肝、丙肝等疾病的患者中，整合素αVβ6的mRNA表达量升高。在肾疾病相关的慢性炎症和纤维化疾病中整合素αVβ6的表达较于正常肾组织显著提高。此外，在糖尿病、肺出血肾炎综合症、Alport综合症、狼疮性肾炎等病人活检样品中整合素αVβ6都显著高表达(Koivisto et al,The international journal ofbiochemistry&cell biology,2018,99:186.)。

组织纤维化可发生于多种器官，是一种较为常见的纤维化疾病包括特发性肺纤维化(IPF)、非酒精性脂肪肝(NASH)、肝硬化、肾纤维化、硬皮症、心肌纤维化等。组织损伤和炎症是纤维化的重要诱因。由于炎症导致器官实质细胞发生坏死，局部免疫细胞被激活，多种血细胞进入损伤部位。被激活的免疫细胞产生大量具有高度生物活性的细胞因子和趋化因子，导致间充质细胞的局部激活，这些细胞产生细胞外基质(ECM)，破坏细胞外微环境，并进一步增加促炎细胞因子、趋化因子和血管生成因子的产生。最终，细胞外基质异常增多和过度沉积而发生病变致使组织纤维化(Ricard-Blum et al,Matrix Biology,2018,68:122.)。纤维化的主要特征是形成和沉积过多的纤维结缔组织。慢性的伴纤维化损伤会使组织结构被破坏、器官功能发生障碍最终导致器官衰竭。

目前获批上市的整合素抑制剂尚为数不多，亟需开发一类结构新颖的，活性好且更加安全有效的整合素调节剂。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐：

其中，所述R

所述R

所述Ar选自任选被一个、两个或更多个R

所述R

所述L

根据本发明的实施方案，所述L

根据本发明的实施方案，优选的，所述L

根据本发明的实施方案，所述“卤素”选自F、Cl、Br、I；所述“脂肪烃基”选自烷基、烯基、炔基；

根据本发明的实施方案，优选的，所述R

根据本发明的实施方案，优选的，所述R

根据本发明的实施方案，所述Ar选自任选被一个、两个或更多个R

根据本发明的实施方案，优选的，所述R

根据本发明的实施方案，优选的，所述R

根据本发明的实施方案，所述R

根据本发明的实施方案，优选的，所述Ar选自如下基团：

所述结构中，R

根据本发明的实施方案，更优选的，所述R

根据本发明的实施方案，所述式I结构选自如下式Ia：

所述式Ia结构中，R

所述式Ia的*S

所述式Ia中，*S

根据本发明的实施方案，所述式I可以选自在一个所述标记处具有特定立体构型的化合物，或在两个所述标记处均具有不同特定立体构型的化合物。

根据本发明的实施方案，所述式I结构可以选自如下式IIa-IIj：

所述式IIa-IIj结构中，R

根据本发明的实施方案，所述式I化合物进一步优选为如下式III(式IIIa、式IIIb)、式IV(式IVa、式IVb)：

根据本发明的实施方案，所述式III(式IIIa、式IIIb)、式IV(式IVa、式IVb)结构中，R

根据本发明的实施方案，所述式I化合物进一步优选为如下式V至式XVII：

根据本发明的实施方案，所述式V至式VII结构中，R

根据本发明的实施方案，所述式I(包括式II至式VII)所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，式I化合物的举例性的、非限制性的具体实例如下所示：

所述结构式中，以星号(“*”)标记表明所述结构在星号所示碳位具有手性，因而可以以所述标记位置具有相反构象的异构体混合物形式存在，并通过手性拆分得到具有所述结构的两种异构体。根据本发明的实施方案，所述式I化合物的立体异构体还可以进一步选自例如如下结构：

本发明还提供所述式I所示的化合物(包括式II至式VII)及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐的制备方法，但不仅限于以下描述的方法。所有的原料都是根据符合通式规律的目标分子的基团特征，并通过这些路线中的方案、有机化学领域普通技术人员熟知的方法制备或者直接购买的。可将用下述方法和合成有机化学领域中已知的合成方法或本领域技术人员意识到的有关改变方法结合在一起，合成本发明化合物。本领域技术人员可知，根据特定的目标结构，可以任选采用下述一种或几种方案进行结合，或者一种或几种方案中的任意步骤进行组合得到合成方案。

本发明所述化合物的制备方法包括：在合适的条件下，将含萘啶环结构的原料与含氮杂双环[3.1.0]己烷结构的原料在合适的试剂中进行反应，并任选的，在合适的条件下，进行上保护基，脱保护基，取代，缩合，还原胺化或水解步骤。具体的，可以参照如下方案进行合成。

在第一种方案中，本发明的化合物的制备包括如下步骤中的一步或几步：

所述方案中，所述R

本发明进一步提供一种药物组合物，其包含本发明所述的式I化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明所述的药物组合物进一步包含治疗有效量的本发明所述式I化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

所述药物组合物中的载体为“可接受的”，其可与组合物的活性成分相容(并且优选地，能够稳定活性成分)并且对被治疗的受试者不是有害的。可以使用一种或多种增溶剂作为药物赋形剂用于递送活性化合物。

本发明进一步提供所述式I化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐或所述药物组合物在制备整合素调节剂中的应用。

本发明进一步提供所述式I化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐或所述药物组合物在制备预防，调节或治疗与整合素活性有关的疾病或病症的药物中的用途。

本发明进一步提供所述式I化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐或所述药物组合物在制备用于治疗纤维化性疾病，炎性疾病或细胞增殖性疾病的药物中的用途。

本发明进一步提供所述式I化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐或所述药物组合物在制备用于抑制细胞中TGF-β活化的药物中的用途。

本发明还提供了一种在受试者中调节至少一种整合素活性的方法，该方法包括给予本发明所述化合物作为治疗剂。

本发明中，化合物对整合素的调节作用是对αVβ1，αVβ3，αVβ5，αVβ6，αVβ8，α5β1和α8β1中的任一种或αVβ1，αVβ3，αVβ5，αVβ6，αVβ8，α5β1和α8β1中的一个或多个的组合的调节作用。在一些实施方式中，所述调节作用表现为抑制作用。在一些实施方式中，所述抑制作用可以是对αVβ1，αVβ3，αVβ5，αVβ6，和αVβ8，α5β1，α8β1的抑制作用；在另一些实施方式中，所述抑制作用是对αVβ1，αVβ3，αVβ5，αVβ6，和αVβ8，α5β1，α8β1中的一种的抑制作用，例如，所述抑制作用是对α8β1的抑制作用；在另一些实施方式中，所述抑制作用包括对α8β1和αVβ1的抑制作用；在另一些实施方式中，所述抑制作用包括对α8β1和α5β1的抑制作用；在另一些实施方式中，所述抑制作用包括对αvβ3和αvβ5的抑制作用；在一些实施方式中，所述抑制作用包括对α8β1，αvβ3和αvβ5的抑制作用；在一些实施方式中，所述抑制作用包括对α8β1，αvβ1和α5β1的抑制作用；在一些实施方式中，所述抑制作用包括对α8β1，αvβ1，αvβ3和αvβ5的抑制作用。在一些实施方式中，所述抑制作用包括对αVβ1，αVβ3，αVβ5，α5β1，α8β1的抑制作用。根据本发明的实施方案，所述整合素包括αVβ1，αVβ3，αVβ5，αVβ6，和αVβ8，α5β1，α8β1中的一个或多个的组合。本发明还提供了一种用于治疗疾病或病症的方法，该方法包括向需要这种治疗的患者单独施用治疗有效量的至少一种本发明的化合物，或任选地，与本发明的另一种化合物和/或至少一种其他类型的治疗剂组合。

本发明还提供了一种抑制细胞中TGF-β活化的方法，该方法包括向该细胞施用式I化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐或所述药物组合物。

在一些实施方案中，所述疾病或病症与纤维化有关，包括肺，肝，肾，心脏，皮肤，眼和胰腺纤维化。

根据本发明的实施方案，所述疾病或病症与细胞增殖性病症例如癌症有关。在一些实施方案中，癌症包括实体瘤生长或瘤形成。在其他实施方案中，癌症包括肿瘤转移。在一些实施方案中，癌症是膀胱癌，血液癌，骨癌，脑癌，乳腺癌，中枢神经系统癌，子宫颈癌，结肠癌，子宫内膜癌，食道癌，胆囊癌，生殖器癌，泌尿生殖道癌，头癌，肾癌，喉癌，肝癌，肺癌，肌肉癌。组织，颈部，口腔或鼻粘膜，卵巢，胰腺，前列腺，皮肤，脾脏，小肠，大肠，胃，睾丸或甲状腺。在其他实施方案中，癌症是肉瘤，淋巴瘤，白血病，黑素瘤，间皮瘤，多发性骨髓瘤或精原细胞瘤。

根据本发明可以预防，调节或治疗的与αV整合素活性有关的疾病，病症或病状的实例包括但不限于移植注射，纤维化病症(例如特发性肺纤维化，间质性肺疾病，肝纤维化，非酒精性脂肪性肝，原发性硬化性胆管炎(PSC)，肾纤维化，皮肤纤维化，心肌纤维化，系统性硬化)，炎症性疾病(例如急性肝炎，慢性肝炎，，牛皮癣，肠易激综合征(IBS)，炎症性肠病(IBD))，骨质疏松症以及细胞增殖性疾病(例如癌症，骨髓瘤，纤维瘤，肝癌，白血病，卡波西氏肉瘤，实体瘤)。

适用于通过本发明化合物预防或治疗的纤维化疾病，炎性疾病以及细胞增殖性疾病包括但不限于特发性肺纤维化(IPF)，间质性肺病，非特异性间质性肺炎(NSIP)，常规间质性肺炎(UIP)，辐射诱发性纤维化，家族性肺纤维化，气道纤维化，慢性阻塞性肺疾病(COPD)，糖尿病性肾病，局灶性节段性肾小球硬化，IgA肾病，药物或移植引起的肾病，自身免疫性肾病，狼疮性肾炎，肝纤维化，肾脏纤维化，慢性肾脏病(CKD)，糖尿病肾病(DKD)，皮肤纤维化，瘢痕，全身性硬化，硬皮病，病毒性纤维化，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，酒精性或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，急性肝炎，慢性肝炎，肝硬化，原发性硬化性胆管炎，药物性肝炎，胆汁性肝硬化，门脉高压，再生衰竭，肝功能不全，肝血流异常，肾病，肺炎，牛皮癣，肠易激综合征罗马(IBS)，炎性肠病(IBD)，胰腺分泌异常，前列腺增生，神经性膀胱疾病，脊髓肿瘤，椎间盘疝，椎管狭窄，心力衰竭，心脏纤维化，血管纤维化，血管周纤维化，足口疾病，癌症，骨髓瘤，纤维瘤，肝癌，白血病，慢性淋巴细胞性白血病，卡波济肉瘤，实体瘤，脑梗死，脑出血，神经性疼痛，周围神经病，年龄相关性黄斑变性(AMD)，青光眼，眼纤维化，角膜瘢痕形成，糖尿病性视网膜病变，增生性玻璃体视网膜病变(PVR)，瘢痕性天疱疮性青光眼滤过手术瘢痕，克罗恩病或系统性红斑狼疮；伤口愈合异常导致瘢痕形成；器官移植后发生纤维化，骨髓纤维化和肌瘤。本发明还提供了一种用于治疗纤维化疾病，炎性疾病或细胞增殖性疾病的方法，包括向需要这种治疗的患者施用治疗有效量的至少一种化合物。单独地或任选地与本发明的另一种化合物和/或至少一种其他类型的治疗剂组合的本发明的“抗氧化剂”。在另一些实施方案中，本发明提供了用于治疗的本发明化合物。

本发明的化合物可以与另外的治疗剂例如一种或多种抗纤维化和/或抗炎治疗剂组合使用。

本发明进一步提供了一种用于治疗纤维化疾病，炎性疾病或细胞增殖性疾病的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的第一和第二治疗剂，其中第一治疗剂是本发明的化合物。在一些实施方案中，本发明提供了本发明所述化合物与另外的治疗剂的组合制剂，用于在治疗中同时，分开或依次使用。

术语解释：

除非另有说明，本申请说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当属于本申请说明书记载的范围。

本申请说明书和权利要求书记载的数值范围，当该数值范围被定义为“整数”时或按照本领域常规理解通常为“整数”时，应当理解为记载了该范围的两个端点以及该范围内的每一个整数。例如，“0～6”表示碳数时，应当理解为记载了0、1、2、3、4、5和6的每一个整数。“更多个”表示三个或三个以上。

术语“卤素”指F、Cl、Br和I。换言之，F、Cl、Br和I在本说明书中可描述为“卤素”。

本文所述任选的被取代基所取代的情形涵盖了无取代以及被一个或多个取代基所取代的情形，例如“任选被一个、两个或更多个R取代”意味着可以不被R取代(无取代)或被一个、两个或更多个R取代。

术语“脂肪烃基”包括饱和或不饱和，直链或支链的链状或环状烃基，所述脂肪烃基的类型可选自烷基、烯基、炔基等，所述脂肪烃基的碳原子数优选为1-12，还可以为1-10，进一步的优选范围为1-6，具体可包括但不限于如下基团：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-甲基乙烯基、1-丁烯基、1-乙基乙烯基、1-甲基-2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、1-己烯基、乙炔基，1-丙炔基，2-丙炔基，1-丁炔基，1-甲基-2-丙炔基，3-丁炔基，1-戊炔基、1-己炔基、环丙基、环丁基、环戊基和环己基；

术语“C

术语“3-12元杂环基”意指饱和或不饱和的一价单环或双环，其包含1-5个独立选自N、O和S的杂原子，含杂原子的基团不具有芳香性，所述3-12元杂环基，优选3-10元杂环基。术语3-12元杂环基意指饱和的一价单环或双环，其包含1-5个，优选1-3个选自N、O和S的杂原子。所述杂环基可以通过所述碳原子中的任一个或氮原子(如果存在的话)与分子的其余部分连接。特别地，所述杂环基可以包括但不限于：4元环，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基；5元环，如四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氧杂环戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基；或6元环，如四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基或三噻烷基；或7元环，如二氮杂环庚烷基。任选地，所述杂环基可以是苯并稠合的。所述杂环基可以是双环的，例如但不限于5,5元环，如六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-基环，或者5,6元双环，如六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基环。含氮原子的环可以是部分不饱和的，即它可以包含一个或多个双键，例如但不限于2,5-二氢-1H-吡咯基、4H-[1,3,4]噻二嗪基、4,5-二氢噁唑基或4H-[1,4]噻嗪基，或者，它可以是苯并稠合的，例如但不限于二氢异喹啉基，2,3-二氢苯并呋喃基，3,4-二氢-2H-1-苯并吡喃基(色烷基)，2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁烷基。所述3-12元杂环基还可以选自例如如下基团：

术语“C

术语“5-14元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是5或6或9或10个碳原子，且其包含1-5个，优选1-3个独立选自N、O和S的杂原子，并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻-4H-吡唑基等以及它们的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基、异喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它们的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基等。

除非另有说明，杂环基或杂芳基包括其所有可能的异构形式，例如其位置异构体。因此，对于一些说明性的非限制性实例，吡啶基或亚吡啶基包括吡啶-2-基、亚吡啶-2-基、吡啶-3-基、亚吡啶-3-基、吡啶-4-基和亚吡啶-4-基；噻吩基或亚噻吩基包括噻吩-2-基、亚噻吩-2-基、噻吩-3-基和亚噻吩-3-基。

根据其分子结构，本发明的化合物可以是手性的，因此可能存在各种对映异构体形式。因而这些化合物可以以消旋体形式或光学活性形式存在。本发明的化合物或其中间体可以通过本领域技术人员公知的化学或物理方法分离为对映异构体化合物，或者以此形式用于合成。在外消旋的胺的情况中，通过与光学活性的拆分试剂反应，从混合物制得非对映异构体。适当的拆分试剂的示例是光学活性的酸，例如R和S形式的酒石酸、二乙酰酒石酸、二苯甲酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸、适当的N-保护的氨基酸(例如N-苯甲酰脯氨酸或N-苯磺酰基脯氨酸)或各种光学活性的樟脑磺酸。借助光学活性的拆分试剂(例如固定在硅胶上的二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸、三乙酸纤维素或其它碳水化合物的衍生物或手性衍生化的异丁烯酸酯聚合物)，也可有利地进行色谱对映体拆分。用于此目的的适当的洗脱剂是含水或含醇的溶剂混合物，例如，己烷/异丙醇/乙腈。

本领域技术人员将理解，由于氮需要具有可用的孤对电子用于被氧化为氮氧化物，因此并非所有的含氮杂环都可以形成N-氧化物；本领域技术人员将识别能够形成N-氧化物的含氮杂环。本领域技术人员还将认识到叔胺能够形成N-氧化物。制备杂环和叔胺的N-氧化物的合成方法对于本领域技术人员而言是熟知的，所述合成方法包括用过氧酸如过氧乙酸和间氯过氧苯甲酸(MCPBA)、过氧化氢、烷基氢过氧化物如叔丁基氢过氧化物、过硼酸钠和双环氧乙烷(dioxirane)如二甲基双环氧乙烷氧化杂环和叔胺。这些制备N-氧化物的方法已在文献中广泛地描述和综述。

药学上可接受的盐可以是例如在链或环中具有氮原子的具有足够碱性的本发明的化合物的酸加成盐，例如与如下无机酸形成的酸加成盐：例如盐酸、氢氟酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、焦硫酸、磷酸或硝酸，或硫酸氢盐、或者与如下有机酸形成的酸加成盐：例如甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水杨酸、2-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、樟脑酸、肉桂酸、环戊烷丙酸、二葡糖酸、3-羟基-2-萘甲酸、烟酸、扑酸、果胶酯酸、过硫酸、3-苯基丙酸、苦味酸、特戊酸、2-羟基乙磺酸、衣康酸、氨基磺酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、己二酸、藻酸、马来酸、富马酸、D-葡糖酸、扁桃酸、抗坏血酸、葡庚酸、甘油磷酸、天冬氨酸、磺基水杨酸、半硫酸或硫氰酸。

另外，具有足够酸性的本发明的化合物的另一种适合的药学上可接受的盐是碱金属盐(例如钠盐或钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐或镁盐)、铵盐，或与提供生理学可接受的阳离子的有机碱形成的盐，例如与如下物质形成的盐：钠离子、钾离子、N-甲基葡糖胺、二甲基葡糖胺、乙基葡糖胺、赖氨酸、二环己基胺、1,6-己二胺、乙醇胺、葡糖胺、葡甲胺、肌氨酸、丝氨醇、三羟基甲基氨基甲烷、氨基丙二醇、1-氨基-2,3,4-丁三醇。作为实例，所述药学上可接受的盐包括基团-COOH与如下物质形成的盐：钠离子、钾离子、钙离子、镁离子、N-甲基葡糖胺、二甲基葡糖胺、乙基葡糖胺、赖氨酸、二环己基胺、1,6-己二胺、乙醇胺、葡糖胺、葡甲胺、肌氨酸、丝氨醇、三羟基甲基氨基甲烷、氨基丙二醇、1-氨基-2,3,4-丁三醇。

另外，碱性含氮基团可用如下试剂季铵化：低级烷基卤化物，例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯，例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯；长链卤化物，例如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物如苄基和苯乙基溴化物等。作为实例，药学上可接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、硫酸氢盐、氢溴酸盐、醋酸盐、草酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、甲酸盐或葡甲胺盐等。

由于本发明的化合物可存在多个成盐位点，所述药学上可接受的盐不仅包括本发明化合物其中1个成盐位点上形成的盐，而且还包括其中2、3或全部成盐位点上形成的盐。为此，所述药学上可接受的盐中式(I)化合物与成盐所需的酸的根离子(阴离子)或碱的阳离子摩尔比可以在较大的范围内变化，例如可以是4:1～1:4，如3:1、2:1、1:1、1:2、1:3等。

根据不同取代基的位置和性质，本发明的化合物还可以包含一个或多个不对称中心。不对称碳原子可以(R)或(S)构型存在，仅有一个不对称中心时，产生外消旋混合物，含有多个不对称中心时，得到非对映异构体混合物。在某些情况下，由于围绕特定键的旋转受阻还可能存在不对称性，例如该中心键连接特定化合物的两个被取代的芳族环。并且，取代基还可以顺式或反式异构的形式存在。

本发明化合物还包括其各自所有可能的立体异构体，其是单一立体异构体或所述立体异构体(例如R-异构体或S-异构体，或者E-异构体或Z-异构体)的任意比例的任意混合物的形式。可通过任意适合的现有技术方法(例如色谱法，特别是例如手性色谱法)实现本发明的化合物的单一立体异构体(例如单一对映异构体或单一非对映异构体)的分离。

术语“互变异构体”是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。本发明化合物可表现出互变异构现象。互变异构的化合物可以存在两种或多种可相互转化的种类。质子移变互变异构体来自两个原子之间共价键合的氢原子的迁移。互变异构体一般以平衡形式存在，尝试分离单一互变异构体时通常产生一种混合物，其理化性质与化合物的混合物是一致的。平衡的位置取决于分子内的化学特性。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占优势；而在酚中，烯醇型占优势。本发明包含化合物的所有互变异构形式。

在本发明中，所涉及的化合物亦包括经同位素标记的化合物，所述经同位素标记的化合物与式I中所示的那些相同，但是其中一或多个原子被原子质量或质量数不同于通常天然存在的原子质量或质量数的原子替代。可掺入本发明的化合物的同位素的实例包括H、C、N、O、S、F及Cl的同位素，分别诸如

术语“有效量”或者“治疗有效量”是指足以实现预期应用(包括但不限于如下定义的疾病治疗)的本发明所述化合物的量。治疗有效量可以取决于以下因素而改变：预期应用(体外或者体内)，或者所治疗的受试者和疾病病症如受试者的重量和年龄、疾病病症的严重性和给药方式等，其可以由本领域普通技术人员容易地确定。具体剂量将取决于以下因素而改变：所选择的特定化合物、所依据的给药方案、是否与其它化合物组合给药、给药的时间安排、所给药的组织和所承载的物理递送系统。

术语“溶剂化物”是本发明的化合物的那些形式，其以固体或液体的状态通过与溶剂分子的配位作用形成配合物。水合物是溶剂化物的特定形式，其中配位作用是与水进行。在本发明中，优选的溶剂化物是水合物。进一步的，本发明通式I化合物的药学上可接受的溶剂化物(水合物)是指化合物I与化学计量学的一个或多个分子的水或其他溶剂形成的共晶和包合物。可用于溶剂化物的溶剂包括但不限于：水、甲醇、乙醇、乙二醇和醋酸。

术语“前药”或称为“药物前体”，代表化合物在体内转化为前述通式或具体化合物所示的化合物。这样的转化受前体药物在血液中水解或在血液或组织中经酶转化为母体结构的影响。本发明前药可以是酯，在本发明中酯可以作为前药的有苯酯类，脂肪族酯类，酰氧基甲基酯类，碳酸酯，氨基甲酸酯类和氨基酸酯类。例如本发明里的一个化合物包含羟基/羧基，即可以将其酰化得到前体药物形式的化合物。其他的前药形式包括磷酸酯，如这些磷酸酯类化合物是经母体上的羟基磷酸化得到的。

有益效果

1)本发明提供了新颖的通式I化合物，具有对整合素的良好抑制作用；

2)本发明化合物对多种整合素亚型均具有抑制作用，其中一些化合物对所有亚型都有良好的抑制作用，一些化合物对αVβ1，αVβ3，αVβ5，αVβ6αVβ8，α5β1和α8β1中的一种或几种具有明显的抑制作用。

具体实施方式

下文将结合具体实施例对本发明的技术方案做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。

除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。

仪器仪表和一般方法

采用氘代试剂(DMSO-d

实施例

通用中间体的合成步骤示例：

步骤1：(1R,5S,6s)-6-((2-甲氧基-2-氧代-1-苯基乙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯

在N

步骤2：(1R,5S,6s)-6-((2-甲氧基-2-氧代-1-苯基乙基)(甲基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯

在N

步骤3：2-(((1R,5S,6s)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)(甲基)氨基)-2-苯基乙酸甲酯

向(1R,5S,6s)-6-(((2-甲氧基-2-氧代-1-苯基乙基)(甲基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸酯叔丁酯(661mg，1.83mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)，将所得混合物在25℃下搅拌16小时。真空除去溶剂，得到呈黄色油状的标题化合物(477mg，粗品)。LC-MS:ESI m/z 261.12[M+H]

步骤1：(1R,5S,6s)-6-((3-乙氧基-3-氧代-1-苯基丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯

在N

步骤2：3-(((1R,5S,6s)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)-3-苯基丙酸乙酯

在N

步骤1.(1R,5S,6s)-6-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯

在N

步骤2.((1R,5S,6s)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基甲酸苄酯

在N

步骤3.7-(3-((1R,5S,6s)-6-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯

在N

步骤4.7-(3-((1R,5S,6s)-6-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯

向7-(3-((1R,5S,6s)-6-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(2.62g，5.17mmol)的甲醇(40mL)溶液加入10％钯碳(460mg)，得到的混合物在25℃，H

具体化合物的合成如下：

实施例1.化合物1的合成

步骤1.7-(3-((1R,5S,6s)-6)-((2-甲氧基-2-氧代-1-苯基乙基)(甲基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯

在N

步骤2.2-(甲基((1R,5S,6s)-3-(3-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)丙基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)-2-苯基乙酸

在N

实施例2参照化合物1的合成方法，可以得到以下化合物：

化合物2(甲酸盐)：

化合物3(甲酸盐)：

化合物4(甲酸盐)：

将中间体A的起始原料替换成(1R,5S,6r)-6-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯，按照相似的方法，可以得到：

化合物5(甲酸盐)：

化合物6(甲酸盐)：

实施例3化合物7的合成

步骤1.7-(3-((1R,5S,6s)-6-((3-乙氧基-3-氧代-1-苯基丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3，4-二氢-1，8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯

在N

步骤2.3-苯基-3-(((1R,5S,6s)-3-(3-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)丙基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)丙酸

向7-(3-((1R,5S,6s)-6-((3-乙氧基-3-氧代-1-苯基丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3，4-二氢-1，8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(94mg，0.17mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中，滴加三氟乙酸(2mL)，在25℃下搅拌16小时。真空除去溶剂，得到3-苯基-3-(((1R,5S,6s)-3-(3-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘吡啶-2-基)丙基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)丙酸乙酯的三氟乙酸盐(77mg，粗品)，为黄色油状物。LC-MS：ESI m/z 449.28[M+H]

得到的化合物7，通过制备手性SFC，在以下条件下分离粗残余物：[柱：DaicelChiralPak IG(250×30mm，10μm)；流动相：60％甲醇的二氧化碳溶液(含0.1％NH

化合物7a(胺盐)：

化合物7b(胺盐)：

实施例4参照化合物7的合成方法，可以得到以下化合物：

化合物8(甲酸盐)：

1.87(m,3H),1.76–1.52(m,5H).LC-MS:ESI m/z 435.22[M+H]

C

化合物10(甲酸盐)：

2.87(m,2H),2.82–2.69(m,5H),1.99–1.93(m,6H).LC-MS:ESI m/z:421.2[M+H]

C

按照中间体A的N-甲基化方法，结合化合物7的合成方法，可以得到化合物12：

将中间体B的原料替换成(1R,5S,6r)-6-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯，按照与化合物7相似的合成方法，可以得到化合物13(甲酸盐)：

化合物14(甲酸盐)：

化合物15(甲酸盐)：

化合物16(甲酸盐)：

实施例5化合物17的合成

步骤1.7-(3-((1R,5S,6s)-6-((3-乙氧基-3-氧代-1-苯基丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-3-氧代丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯

在N

步骤2.3-苯基-3-(((1R,5S,6s)-3-(3-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘吡啶-2-基)丙酰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)丙酸

向7-(3-((1R,5S,6s)-6-((3-乙氧基-3-氧代-1-苯基丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)-3-氧代丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(166mg，0.3mmol)的二氯甲烷(3mL)加入三氟乙酸(2mL)将得到的混合物在25℃下搅拌16小时。真空除去溶剂，得到3-苯基-3-(((1R,5S,6s)-3-(3-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘吡啶-2-基)丙酰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)丙酸乙酯的三氟乙酸盐(138mg，粗品)，为浅黄色油状物。LC-MS:ESI m/z 463.28[M+H]

得到的化合物17，通过制备手性SFC，在以下条件下分离粗残余物：[柱：DaicelChiralPak IG(250×30mm，10μm)；流动相：60％甲醇的二氧化碳溶液(含0.1％NH

化合物17a(胺盐)：

化合物17b(胺盐)：

实施例6参照化合物17的合成方法，可以得到以下化合物：

化合物18(甲酸盐):

化合物18通过制备手性SFC，在以下条件下分离粗残余物：[柱：Daicel ChiralPakAD(250×30mm，10μm)；流动相：60％甲醇的二氧化碳溶液(含0.1％DEA)；流速：70g/min]，分别得到化合物18a和化合物18b，为白色固体。

化合物18a(胺盐)：

化合物18b(胺盐)：

实施例7化合物19的合成方法

步骤1.3-(4-异丙氧基苯基)-3-氧代丙酸甲酯

在N

步骤2.(1R,5S,6s)-6-((1-(4-异丙氧基苯基)-3-甲氧基-3-氧丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯

在N

步骤3.3-(((1R,5S,6s)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)-3-(4-异丙氧基苯基)丙酸甲酯

在N

步骤4.7-(3-((1R,5S,6s)-6-((1-(4-异丙氧基苯基)-3-甲氧基-3-氧丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯

在N

步骤5.3-(4-异丙氧基苯基)-3-(((1R,5S,6s)-3-(3-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)丙基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)丙酸

向7-(3-((1R,5S,6s)-6-((1-(4-异丙氧基苯基)-3-甲氧基-3-氧丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(0.40g，0.67mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入HCl/dioxane(1.7mL,6.7mmol)。将混合物在25℃下搅拌18小时。将混合物浓缩至干，得到3-(4-异丙氧基苯基)-3-(((1R,5S,6s)-3-(3-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶)-2-基)丙基)-3-氮杂双环[3.1.0]己基-6-基)氨基)丙酸甲酯的三氟乙酸盐(0.50g，粗品)，呈红色油状，其无需进一步纯化直接用于下一步。LC-MS：(ESI)m/z493.3[M+H]

实施例8参考化合物19的合成方法，可以得到如下化合物：

化合物20(甲酸盐)：

化合物21(甲酸盐)：

化合物22(甲酸盐)：

化合物23(甲酸盐)：

得到的化合物23，通过制备手性SFC，在以下条件下分离粗残余物：[柱：DaicelChiralPak OZ-H(250×20mm，5μm)；流动相：50％甲醇的二氧化碳溶液(含0.2％的DEA)；流速：40g/min]，分别得到化合物23a和化合物23b。

化合物23a(胺盐):

化合物23b(胺盐):

化合物24(甲酸盐)：

得到的化合物24，通过制备手性SFC，在以下条件下分离粗残余物：[柱：DaicelChiralPak OZ-H(250×20mm，5μm)；流动相：50％甲醇的二氧化碳溶液(含0.2％的DEA)；流速：40g/min]，分别得到化合物24a和化合物24b。

化合物24a(胺盐):

化合物24b(胺盐):

化合物25(甲酸盐)：

化合物26(甲酸盐)：

化合物27(甲酸盐)：

得到的化合物27，通过制备手性SFC，在以下条件下分离粗残余物：[柱：DaicelChiralPak OZ-H(250×20mm，5μm)；流动相：50％甲醇的二氧化碳溶液(含0.2％的DEA)；流速：40g/min]，分别得到化合物27a和化合物27b。

化合物27a(胺盐):

化合物27b(胺盐):

化合物28(甲酸盐)：

化合物29(甲酸盐)：

实施例9化合物30的合成

步骤1:7-(3-((1R,5S,6s)-6-((1-(4-氯苯基)-3-乙氧基-3-氧丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯

在N

步骤2：3-(4-氯苯基)-3-(((1R,5S,6s)-3-(3-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)丙基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)丙酸

向7-(3-((1R,5S,6s)-6-((1-(4-氯苯基)-3-乙氧基-3-氧丙基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙基)-3,4-二氢-1,8-萘啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(107mg，0.18mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)，将得到的混合物在25℃下搅拌16小时。真空除去溶剂，得到3-(4-氯苯基)-3-(((1R,5S,6s)-3-(3-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)丙基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基)丙酸甲酯的三氟乙酸盐(89mg，粗品)，呈黄色油状。LC-MS:ESI m/z 483.20,485.17[M+H]

实施例10参考化合物30及化合物17的合成方法，可以合成如下化合物，

化合物31(甲酸盐)：

化合物32(甲酸盐)：

化合物33(甲酸盐)：

化合物34(甲酸盐)：

得到的化合物34，通过制备手性SFC，在以下条件下分离粗残余物：[柱：DaicelChiralPak IG(250×30mm，10μm)；流动相：60％甲醇的二氧化碳溶液(含0.1％NH

化合物34a(胺盐)：

化合物34b(胺盐)：

化合物35(甲酸盐)：

化合物36(甲酸盐):

化合物37(甲酸盐)：

化合物38(甲酸盐):

得到的化合物38，通过制备手性SFC，在以下条件下分离粗残余物：[柱：DaicelChiralPak OZ-H(250×20mm，5μm)；流动相：50％甲醇的二氧化碳溶液(含0.2％的DEA)；流速：40g/min]，分别得到化合物38a和化合物38b。

化合物38a(胺盐):

化合物38b(胺盐):

化合物39(甲酸盐)：

化合物40(甲酸盐):

化合物41(甲酸盐)：

化合物42(甲酸盐):

C

化合物43(甲酸盐)：

化合物44(甲酸盐):

化合物45(甲酸盐)：

生物活性评价实验实验材料：带有His标签的人类整合素蛋白购自AcroBiosystems公司，包括α5β1(IT1-H52W5)，α8β1(IT1-H52W9)，αvβ1(IT1-H52E1)，αvβ3(IT3-H52E3)，αvβ5(IT8-H52W5)，αvβ6(IT6-H52E1)，αvβ8(IT8-H52W4)。蛋白用无菌水溶解，分装后储存于-80℃。生物素标记的多肽由GenScript合成，DMSO溶解后分装存于-20℃。

实验方法：将备选化合物用DMSO溶解，按一定浓度梯度加到Source板上，然后用ECHO550将化合物转移到目标板，使之形成11个浓度。按下表所示的整合素对应RGD多肽以及工作浓度，用反应缓冲液稀释，轻柔混匀，并用Multidrop以每孔10μl加到目标板中，室温孵育1个小时。每孔加入10μl Donor/Acceptor beads(终浓度15μg/mL)，室温孵育一个小时。最后用Envision Plate Reader读数。每个化合物的IC

表1：本发明化合物对不同整合素亚型抑制活性的效果评价注：A：<100nM；B：100-1000nM；C：>1000nM

上述实验结果表明：本发明化合物对不同整合素亚型均具有良好抑制作用。

以上对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。