结合生物基质胶生成hiPSC-RPE细胞膜片的方法

摘要

本发明涉及一种结合生物基质胶生成hiPSC‑RPE细胞膜片的方法，包括，步骤S1，将预处理后的猪眼葡萄膜制备脱细胞基质胶；步骤S2，维持培养hiPSCs；步骤S3，培养hiPSC‑RPE悬浮球；步骤S4，hiPSC‑RPE细胞扩增培养；步骤S5,生成hiPSC‑RPE细胞膜片；其中，所述步骤S5中，将浓度为1％的Uvea‑Gel包被培养皿，于37℃放置30min左右，待Uvea‑Gel凝固，形成一层薄薄的膜样区域为BM膜，用以模拟天然BM微环境。本发明优化出从猪脉络膜组织分离制备脱细胞基质水凝胶，结合建立的hiPSC诱导3D视网膜分化系统，获得hiPSC‑RPE细胞，建立模拟Bruch膜(BM)微环境的生成RPE片的方法，为培养GMP级别干细胞提供安全有效的生物材料。