一种高效的植物广靶向腺嘌呤单碱基编辑器及其构建与应用

摘要

本发明公开了一种高效的植物广靶向腺嘌呤单碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含水稻密码子序列偏好性优化的核酸序列编码的SpCas9变体融合蛋白TadA8e‑DBD‑SpRY(hyABE8e‑SpRY)，从N端到C端，依次核定位信号bpNLS，脱氨酶TadA8e，DNA单链结合域DBD，SpCas9缺刻酶变体SpRYn，以及核定位信号bpNLS。相比现有植物腺嘌呤单碱基编辑器，本发明构建的腺嘌呤单碱基编辑器具有高效、广靶向识别几乎所有NNN‑PAM、更宽的编辑窗口、无靶序列偏好性、可检测的自靶向sgRNA效应、以及脱靶效率低的特点。