一种提高咖啡酸产量的菌株的制备方法和催化应用

摘要

本发明公开了一种提高咖啡酸产量的菌株的制备方法和催化应用，选取一种出发质粒，在质粒的酶切位点连接单加氧酶基因HpaBC，获得环形质粒pHG04，以获得的环形质粒pHG04为模板，在其酶切位点连接脱氢酶基因FDH，获得环形重组质粒pHG05，再以大肠杆菌代谢菌为出发菌株，通过化学转化法导入环形重组质粒pHG05，获得构建重组菌株sHG05；以构建重组菌株sHG05作为生物酶，经过细胞培养并诱导，再催化4‑香豆酸制备咖啡酸，并检测咖啡酸的产量。本发明以大肠杆菌代谢菌为出发菌株，通过化学转化法导入重组质粒pHG05，获得一种新的生产咖啡酸的菌株，可作为生物酶催化4‑香豆酸制备咖啡酸，能够为反应过程提供了充足的胞内辅酶，降低底物残留，提高咖啡酸产量。