一种乌饭树实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法

摘要

本发明涉及植物基因工程技术，公开了一种乌饭树实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法。该筛选方法包括以下步骤：(1)利用乌饭树转录组测序数据，挑选N个乌饭树候选内参基因，以挑选的N个乌饭树候选内参基因为模板，分别设计实时荧光定量PCR的内参基因引物对，其中N≥2；(2)以乌饭树组织的RNA反转录获得的cDNA为模板，以内参基因引物对为反应引物对，进行实时荧光定量PCR分析；(3)将实时荧光定量PCR得到的数据导入GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件进行分析，筛选出最优内参基因和/或内参基因组合。本发明通过分析各候选内参基因的表达变化，筛选出相对稳定的基因作为内参基因，有助于在乌饭树基因表达研究中获得可靠的标准化qRT‑PCR数据。