一种利用DNA改组提高大肠杆菌工程菌产核黄素能力的方法

摘要

本发明提供了一种利用DNA改组提高大肠杆菌工程菌产核黄素能力的方法，涉及基因工程领域，包括如下步骤：构建含26个基因的产核黄素的大肠杆菌工程菌；T7RNA聚合酶基因表达单元DNA重排和定向筛选，抽提获得第一批阳性质粒；核黄素生物合成和转运系统的DNA重排和定向筛选，抽提获得第二批阳性质粒；大肠杆菌σ因子基因的DNA重排和定向筛选，抽提获得第三批阳性质粒；将第三批质粒导入到不同底盘细胞获得重组菌株；选取核黄素产量最高的阳性菌株。有效消除产核黄素的大肠杆菌工程菌构建过程中T7RNAP对大肠杆菌宿主的毒性问题、产物的反馈抑制问题以及构建的核黄素生物合成基因的适度和协调表达问题。进一步提高大肠杆菌工程菌株生物合成核黄素的效率和产量。