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一种慢病毒转移载体、表达PylRS及tRNACUA的细胞系及制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种慢病毒转移载体、表达PylRS及tRNACUA的细胞系及制备方法与应用。首先构建编码吡咯赖氨酸氨酰tRNA合成酶及tRNACUA的慢病毒转移载体(SEQ ID NO:2),然后通过细胞转染拯救携载了上述目的元件的慢病毒,并将慢病毒以高MOI感染HEK293T细胞,传代5次后挑单克隆做PCR鉴定获得稳定细胞系。为了验证细胞系对目的蛋白掺入非天然氨基酸的效果,制备了绿色荧光蛋白报告质粒pcDNA3.1‑EGFP‑Y39TAG(SEQ ID NO:3),通过该报告质粒转染验证了上述稳定细胞系的功能。

著录项

  • 公开/公告号CN114107394A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2022-03-01

    原文格式PDF

  • 申请/专利号CN202111305716.9

  • 申请日2021-11-05

  • 分类号C12N15/867(20060101);C12N15/65(20060101);C12N7/01(20060101);C12N5/10(20060101);C12R1/91(20060101);

  • 代理机构42001 武汉宇晨专利事务所(普通合伙);

  • 代理人庞宽

  • 地址 430071 湖北省武汉市武昌区小洪山西30号

  • 入库时间 2023-06-19 14:22:08

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2022-03-01

    公开

    发明专利申请公布

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