基于Crispr-cas9技术构建HCMV编码miRNA缺失株的方法及其应用

摘要

本发明提供一种构建重组人巨细胞病毒的方法及其应用。本发明构建重组人巨细胞病毒的方法利用Crispr‑Cas9技术快速、高特异性的构建了HCMV编码miRNA缺失株，所得HCMV编码miRNA缺失株在编码hcmv‑miR‑US33as‑5p部位发生基因突变，而在其他部位序列无改变，可在易感染细胞中传代。本发明还利用构建的HCMV编码miRNA缺失株，证实了IFNAR1是hcmv‑miR‑US33as‑5p的靶标，抑制该miRNA分子的表达可导致宿主细胞IFNAR1的恢复性上调。针对hcmv‑miR‑US33as‑5p的抑制物有作为抗疱疹病毒感染防治候选药物中应用的价值。