利用创制小麦TaOTUB1基因功能缺失纯合突变体提高小麦产量的方法

摘要

本发明涉及利用创制小麦TaOTUB1基因功能缺失纯合突变体提高小麦产量方法，在小麦TaOTUB1基因序列中寻找合适的sgRNA位点，构建小麦基因组编辑载体PBUE411‑sgRNA(otub1)，并导入到农杆菌菌系EHA105；利用携带PBUE411‑sgRNA(otub1)载体的农杆菌菌系EHA105遗传转化小麦幼胚愈伤组织；用检测试剂盒及酶切筛选小麦TaOTUB1的三个部分同源基因突变的小麦再生植株；TaOTUB1基因突变的再生植株温室加代、连续自交，用HI‑TOM检测试剂盒及酶切筛选TaOTUB1基因功能缺失纯合突变体植株，并用叶片涂抹草铵膦鉴定筛选不含PBUE411‑sgRNA(otub1)编辑载体的植株；获得不含外源载体的TaOTUB1基因功能缺失纯合突变体植株otub1。其分蘖数和穗粒数显著增多，种子大小和粒重显著增大，单株籽粒产量显著提高，但对其它性状没有显著影响；具有定向、快速、有效、可重复性好的特点。