一种同时表达PLAUR和GPLD1基因的质粒载体及其构建方法

摘要

本发明公开了一种同时表达PLAUR和GPLD1基因的质粒载体及其制备方法。质粒载体构建过程中，先设计一段含有NheⅠ‑AgeⅠ‑SbfⅠ‑EcorⅠ‑NsiⅠ‑MluⅠ‑AvrⅡ‑BamhⅠ酶切位点的DNA，对NheⅠ和BamhⅠ双酶切后回收片段，通过相同的酶切位点将回收片段克隆到双酶切后的pCW‑Cas9‑Blast载体得到新克隆载体pCW‑DNA‑Blast。扩增得到带上述酶切位点的PLAUR和GPLD1基因片段并与pCW‑DNA‑Blast经相同的酶切处理后连接即得。本发明首次通过质粒载体使PLAUR基因与GPLD1基因同时表达，从而在细胞培养上清中获得大量PLUAR蛋白。