单分子检测DNA损伤位点的荧光化学传感器及方法和应用

摘要

本发明涉及单分子检测DNA损伤位点的荧光化学传感器及方法和应用。所述荧光化学传感器包括末端脱氧核苷酸转移酶、甲酰胺嘧啶DNA糖基化酶、多核苷酸激酶，Fpg识别并切除DNA的两个8‑oxoG碱基，产生单链DNA片段和双链DNA片段。Fpg是一种双功能DNA糖基化酶，具有DNA糖基化酶和AP裂解酶活性，它可以识别并切除两个8‑oxoG碱基，产生两个DNA片段。PNK催化两个DNA片段的3’磷酸端去磷酸化，生成3’OH端。Fpg和PNK两种酶协同作用产生游离的3'OH。还包括poly A链。poly A链与得到的富含U和T的长链进行杂交，实现信号的放大。可检测到低至0.001％的氧化损伤水平。