基于金属钛离子亲和色谱的核酸-蛋白复合物提取方法

摘要

本发明公开了一种基于金属钛离子亲和色谱的核酸‑蛋白复合物提取方法，该方法包括如下步骤：步骤S1：甲醛处理活细胞，在核酸和与之相互作用的蛋白间形成共价键；步骤S2：用Trizol裂解交联后的细胞，并通过异丙醇沉淀获得核酸‑蛋白复合物的粗提物；步骤S3：利用Ti4+‑IMAC和核酸上磷酸基团之间的选择性作用捕获核酸‑蛋白复合物；步骤S4：将步骤S3中得到的核酸‑蛋白复合物解交联后，对核酸结合相关蛋白进行质谱分析。本发明根据钛离子和核酸上磷酸基团之间的相互作用，可以特异性地捕获核酸‑蛋白复合物，可以显著降低全细胞蛋白质组的复杂程度，从而减少高丰度蛋白干扰，有助于发现特异性核酸结合相关蛋白。