微生物发酵法制备D-丙氨酸的方法

摘要

本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种微生物发酵法制备D‑丙氨酸的方法。本发明首先构建一株生产D‑丙氨酸的基因工程菌，所述工程菌以谷氨酸棒杆菌ATCC 13032为出发菌株，通过敲除丙氨酸消旋酶基因alr和L‑丙氨酸转氨酶alaT；过表达meso‑二氨基庚二酸脱氢酶编码基因；敲除iolR阻遏蛋白基因同时基因组整合表达葡萄糖激酶基因glk1；整合来自大肠杆菌的edd和eda基因获得。该菌株以葡萄糖为底物直接发酵法生产D‑型氨基酸，成本低，技术简单，5L发酵罐中D‑丙氨酸产量能够达到50‑60g/L。另外，发酵法高效合成D‑型氨基酸属于开创性研究，借此方法，可以对发酵法进行无限扩展，低成本、高效率合成多种D‑型氨基酸。