一株适用多种感受态制备方法的高效价大肠杆菌克隆菌株及其应用

摘要

本发明公开了一株适用多种感受态制备方法的高效价大肠杆菌克隆菌株，该菌株命名为BW3KD，是以大肠杆菌野生株BW25113为出发菌株，通过敲除其基因型中的基因endA、FhuA和DeoR制得。本发明还公开了所述BW3KD菌株在用于制备高效价的大肠杆菌感受态细胞实现DNA的高效转化中的应用。实验证实，本发明的菌株适合于各种感受态制备方法，其效价在其他大肠杆菌中都处于较高位置；基于优化的TSS‑HI法与BW3KD菌株结合其感受态效价可以稳定达到7.21×109±1.85×109CFU/μg DNA；有效解决了不同大肠杆菌制备感受态细胞其效价差异明显的问题；同时该菌株具有生长快的优势，转化当天7h就可以长出单克隆，大大节省了克隆时间，应用前景和经济价值巨大。