基于超滤辅助酶解提高样品中D-二聚体质谱检测灵敏度的方法

摘要

本发明涉及一种基于超滤辅助酶解来提高样品中D‑二聚体蛋白质谱检测灵敏度的方法。取D‑二聚体样品，变性之后，转移到分子截留量小于4K的超滤管内，胰蛋白酶酶解过夜，离心去除分子量小于超滤膜分子截留的肽段同时用缓冲液清洗，收集超滤膜上的溶液，使用液相色谱‑质谱联用仪进行后续检测和定量。由于D‑二聚体结构中特异性的交联肽段分子量大，使用该方法可以有效降低D‑二聚体样品的复杂性，从而提高其在质谱检测中的灵敏度。该方法原理简单，容易操作，样品损失少，可以实现完全不依赖抗体对样品中D‑二聚体蛋白检测定量。