一种防治仔猪肝源性腹泻的饲料添加剂及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种防治仔猪肝源性腹泻的饲料添加剂及其制备方法和应用，饲料添加剂主要包括链甾醇，从红藻或褐藻中提取得到，经冷冻干燥‑有机提取‑烘干研磨‑洗脱烘干一系列操作，获得含链甾醇的饲料添加剂，并和普通饲料按一定比例混合制备得到本发明所述的可防治仔猪肝源性腹泻的饲料，并经实验证明，本发明所提供的饲料可有效防治仔猪肝源性腹泻，且制备成本低。

说明书

技术领域

本发明涉及一种防治仔猪肝源性腹泻的饲料添加剂的制备方法、饲料及其制备方法和应用，属于饲料领域。

背景技术

饲料是当代畜牧业必不可少的重要组成部分，其消耗量约在千万吨级。因此，在饲料中加入一些特定的饲料添加剂可以起到调控营养、预防疾病、改善健康状况、节约成本等作用。

新生儿肝源性腹泻（Newborn Hepatogenic Diarrhea, NHD）属于营养性腹泻的一种，是指新生儿肝脏损伤或者肝功能紊乱，造成胆固醇-胆酸合成通路受阻，引起胆汁分泌异常。当胆汁减少或缺失时会导致乳脂在新生仔猪肠道内不能被有效的乳化吸收滞留在肠道内。肠壁细胞为了维持肠道和肠细胞内外的渗透压，会在仔猪肠道内分泌过多的水分，迅速脱水进而造成腹泻。目前常见的防治手段为向饲料中添加胆酸，但只能一定程度减少肝源性腹泻的发生，且治标不治本，无法从根源上解决腹泻问题。此外，胆酸添加剂的成本也比较高，经济效益难以保障。

发明内容

为解决现有技术中的缺陷，本发明公开一种防治仔猪肝源性腹泻的饲料添加剂及其制备方法和应用，更加方便有效的治疗新生仔猪时期肝源性腹泻造成的幼崽死亡现象。

本发明是采用下述技术方案实现的：

一种饲料添加剂，所述饲料添加剂含有链甾醇。

进一步的，所述链甾醇的提取原材料为藻类。

进一步的，所述藻类为红藻或褐藻。

第二方面，本发明还提供了以上任意一项所述的饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将冷冻干燥后的藻类切碎，并用乙酸乙酯提取得到提取物A；

将提取物A蒸发至干，干燥后的产物加入己烷进行研磨，得到油状混合物B；

使用己烷-乙酸乙酯混合物将油状混合物B洗脱并烘干得到饲料添加剂。

第三方面，本发明还提供了以上任意一项所述的饲料添加剂在制备防治仔猪肝源性腹泻的饲料中的应用。

第四方面，本发明还提供了一种防治仔猪肝源性腹泻的饲料，包括以上任意一项所述的饲料添加剂。

进一步的，包括以下步骤：

将饲料添加剂烘干后进行研磨成粉，并对研磨后的粉末过筛，得到物料粉C；

将物料粉C与普通饲料混合均匀后得到成品饲料。

进一步的，所述混合比例为普通饲料：饲料添加剂为1000:5。

进一步的，所述混合时间为10-15 min。

链甾醇是一种化学药品，分子式为C

与现有技术相比，本发明所达到的有益效果是：

（1）在普通饲料中添加以链甾醇为主要成分的饲料添加剂，为从仔猪进食方面防治仔猪肝源性腹泻提供了一个新的思路；

（2）链甾醇从包括红藻门、褐藻门的藻类中提取，来源丰富，成本低廉；

（3）链甾醇属于动物体内源性物质，安全无毒，且可以精准靶向激活RORγ，并调控胆酸代谢，无需大剂量添加且防治效率极高。

附图说明

图1为本发明实施例3中三组实验仔猪的存活率-喂养时间图；

图2为本发明实施例3中黄曲霉素组与黄曲霉素+链甾醇添加剂组腹泻率的对比图；

图3为本发明实施例3中三组实验中IHC染色仔猪小肠切片紧密连接蛋白ZO-1及细胞核（亮白色区域）图；

图1中由上至下依次是对照组、黄曲霉素+链甾醇添加剂组以及黄曲霉素组；图3中左一为对照组，中间为黄曲霉素组，右一是黄曲霉素+链甾醇添加剂组。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。

实施例1

本发明提供了一种含链甾醇的防治仔猪肝源性腹泻的的饲料添加剂的制备方法，制备方法如下：

称取新鲜的红藻10.0 kg，放入冷冻室低温冷冻并干燥，24 h冻干后取出，称量得到冻干的红藻2.22 kg，将冻干的红藻或者褐藻进行切割成细小碎片，放入干燥皿中，加入足量乙酸乙酯进行提取，提取6 h，得到提取物A，将提取物A放入烘箱进行加热烘干，然后倒入研钵中进行研磨，研磨过程中加入少量己烷，己烷用量为研钵容积的1/3到1/2，研磨充分后得到16.56 g的深色油状混合物B，将油状混合物B倒出，使用10:1的足量的己烷-乙酸乙酯混合液对油状混合物B进行洗脱，洗脱完全后进行烘干得到含有链甾醇的饲料添加剂。

实施例2

本发明还提供了一种添加了实施例1中制备得到的饲料添加剂的饲料加工方法，加工步骤如下：

将饲料添加剂放入研磨机中，研磨得到粉末，对粉末过300目的筛网，颗粒直径未达标的粉末继续研磨，直到全部过筛，得到物料粉C，接着将物料粉与普通饲料以5:1000的比例混合，混合时间为10-15 min，得到本发明所述的饲料。

实施例3

本发明还提供了将实施例2中制得的饲料应用于防治仔猪肝源性腹泻的方法，设置三组实验：

黄曲霉素组：在普通的仔猪日粮加入黄曲霉素，50天后观察仔猪的情况；

黄曲霉素+链甾醇添加剂组：使用实施例2所制备得到的含有链甾醇饲料添加剂的饲料，并在其中加入黄曲霉素，50天后观察仔猪的情况；

对照组：和黄曲霉素组不同的是，仅使用普通仔猪日粮，不添加黄曲霉素，50天后观察仔猪的情况。

如图1所示，黄曲霉素组仔猪50天存活率降至50%，黄曲霉素+链甾醇饲料组将50天时的存活率恢复至80%。

如图2所示，白色区域为正常仔猪，黑色区域代表腹泻仔猪，其中可以看出黄曲霉素组的腹泻率超过60%，黄曲霉素+链甾醇添加剂组的腹泻率低于20%；

如图3所示，根据IHC染色仔猪小肠切片紧密连接蛋白ZO-1及细胞核（亮白色区域），其中，左一为对照组，中间为黄曲霉素组，右一是黄曲霉素+链甾醇添加剂组，对照组中ZO-1在小肠粘膜顶端均匀完整表达，显示肠上皮功能完整性。ZO-1在健康态下也分布在肠道隐窝，支持粘膜结构；而黄曲霉素组表现出肠道炎症，ZO-1向顶端移动，增强表达，是对炎症刺激的一种反应，底部隐窝结构基本确实，ZO-1支撑结构被破坏，并显示大量的免疫浸润，可能为中性粒细胞；黄曲霉素+链甾醇添加剂组则反映出受到治疗的肠粘膜结构相对完整，ZO-1表达较对照组有所降低，少数免疫浸润。

综上所述，本发明所述的添加了链甾醇添加剂的饲料能有效激活生物钟蛋白RORγ加强其对下游基因的转录结合以起到调节胆酸代谢通路，最终达到防治仔猪肝源性腹泻的目的。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变形，这些改进和变形也应视为本发明的保护范围。