一种提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法

摘要

本发明涉及病毒特异性抗体分泌调节技术领域，且公开了大白鼠30只，体重250‑300g，雌、雄各半，分别按体重进行分层随机分为3组，3组进行分别实验操作，再培养后进行样本采集检测。该提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法，自体淋巴细胞通过在体外诱导后进行回输，在实验中可得出数据显示，体外诱导的淋巴细胞自体回输的抗体水平呈跳跃式升高，此实验数据可表明此操作方法可以克服老年人和体弱多病人群对于疫苗反应迟钝或不反应状态，提高特性病毒免疫清除作用，从而减少重症病例的发生率，并且，对于重症病例具有一定的治疗作用。

说明书

技术领域

本发明涉及病毒特异性抗体分泌调节技术领域，具体为一种提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法。

背景技术

随着分子生物学和免疫学技术的发展，利用合理的细胞培养和诱导技术，可以定向某些细胞的靶向性功能。我们在乙肝抗体分泌细胞的调节上，利用患者自身外周血淋巴细胞，经过以乙肝抗体阳性健康者作为调节标准，获得成功。

在时下新冠病毒疫情还没有完全控制，尚有很多不明确的因素，病毒变异和老年人对于疫苗反应性差，重症病人治疗效果不确定等问题，都是迫在眉睫需要研究和攻克的难点。

本专利基于动物实验结果，能够成功在体外诱导抗新冠病毒抗体生成水平，提示提高血清抗体滴度，克服老年人和体弱多病人群对于疫苗反应迟钝或不反应状态，提高特性病毒免疫清除作用，从而减少重症病例的发生率，并且，对于重症病例具有一定的治疗作用。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法，具备提高机体对于疫苗的反应性，提高血清抗体滴度，克服老年人和体弱多病人群对于疫苗反应迟钝或不反应状态，提高特性病毒免疫清除作用，从而减少重症病例的发生率，并且，对于重症病例具有一定的治疗作用，解决了上述背景技术中提出的问题。

(二)技术方案

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：大白鼠30只，体重250-300g，雌、雄各半，分别按体重进行分层随机分为3组，3组进行分别实验操作，再培养后进行样本采集检测。

优选的，步骤3中所述新冠疫苗(vero灭活疫苗)的注射剂量为0.07ug/Kg。

优选的，步骤4所述细胞回输后第二天进行常规疫苗注射，剂量和次数同抗体阳性模板组。

优选的，步骤5所述细胞回输后第二天进行常规疫苗注射，剂量和次数同抗体阳性模板组。

优选的，所述疫苗注射采用大腿背部肌肉注射，所述细胞回输采用静脉注射，所述新冠病毒疫苗注射2-3次间隔2周，所述细胞回输1次，所述新冠病毒疫苗100ul/次只，所述细胞回输1ml/次。

本发明要解决的另一技术问题是提供一种提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法，包括以下步骤：

1)大白鼠30只，体重250-300g，雌、雄各半，分别按体重进行分层随机分为3组；

2)3组分别为抗体阳性模板组(正常免疫)10只，细胞诱导组(自体细胞诱导组)10只,阴性对照组(非诱导)10只；

3)抗体阳性模板组内的大白鼠进行新冠疫苗常规注射，待抗体滴度>1/1000作为诱导模板；

4)细胞诱导组内的白鼠分离外周血淋巴细胞，经过以步骤3中诱导模板为标准的诱导后自体回输，回输后第二天进行新冠疫苗常规免疫注射；

5)阴性对照组的白鼠分离外周血淋巴细胞，体外无诱导培养后自体回输，回输后第二天进行新冠疫苗常规免疫注射；

6)检测结果。

(三)有益效果

与现有技术相比，本发明提供了一种提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法，具备以下有益效果：

该提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法，通过在体外诱导后进行回输，在实验中可得出数据体外诱导的淋巴细胞自体回输的抗体水平呈跳跃式升高，此实验数据可表明此操作方法可以克服老年人和体弱多病人群对于疫苗反应迟钝或不反应状态，提高特性病毒免疫清除作用，从而减少重症病例的发生率，并且，对于重症病例具有一定的治疗作用。

附图说明

图1为本发明提出的一种提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法实验数据折线图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例一：

一种提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)大白鼠30只，体重250-300g，雌、雄各半，分别按体重进行分层随机分为3组；

2)3组分别为抗体阳性模板组(正常免疫)10只，细胞诱导组(自体细胞诱导组)10只,阴性对照组(非诱导)10只；

3)抗体阳性模板组内的大白鼠进行新冠疫苗常规注射，其新冠疫苗(vero灭活疫苗)的注射剂量为0.07ug/Kg待抗体滴度>1/1000作为诱导模板；

4)细胞诱导组内的白鼠分离外周血淋巴细胞，经过以步骤3中诱导模板为标准的诱导后自体回输，回输后第二天进行新冠疫苗常规免疫注射，剂量和次数同抗体阳性模板组；

5)阴性对照组的白鼠分离外周血淋巴细胞，体外无诱导培养后自体回输，回输后第二天进行新冠疫苗常规免疫注射，剂量和次数同抗体阳性模板组；

6)检测结果，对3组大白鼠给药前、每次给药后两周用惰性分离胶促凝管采集血液约0.5mL血液在采集后放入样品运输箱，2h内送临检部门检测。

实验例：

在含有新冠病毒疫苗2ng/ml培养基培养第五天，检测上清中新冠病毒灭活蛋白滴度，体外诱导组在1/8稀释后出现阴性结果，非体外诱导组在1/64才转阴性，见表1。在含有新冠病毒疫苗4ng/ml培养基培养第10天，检测上清中新冠病毒灭活蛋白滴度，体外诱导组在1/32倍稀释时出现阴性孔，1/64时完全转阴，而非体外诱导组在该稀释度无转阴孔，见表2。

表1.含有新冠病毒疫苗2ng/ml培养第五天上清中病毒抗原滴度

表2.含有新冠病毒疫苗4ng/ml培养第10天上清中病毒抗原滴度

判断标准：抗体水平。

本发明的有益效果是：该提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法，自体淋巴细胞通过在体外诱导后进行回输，在实验中可得出的数据显示，体外诱导的淋巴细胞自体回输的抗体水平呈跳跃式升高，此实验数据可表明此操作方法可以克服老年人和体弱多病人群对于疫苗反应迟钝或不反应状态，提高特性病毒免疫清除作用，从而减少重症病例的发生率，并且，对于重症病例具有一定的治疗作用。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下，可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。