一种牛奶中三聚氰胺的检测方法

摘要

本发明属于食品检测领域，具体涉及一种牛奶中三聚氰胺的检测方法，包括以下步骤：S1、将质量分数10％的三氯乙酸和待测牛奶以2‑2.2:5的体积比混合，得到混合溶液A，混匀；S2、将S1的混合溶液A离心，取上层清液，后调整上层清液的pH值至7‑9；S3、向S2的上层清液中依次加入1/1000‑1/1100其体积的9.8‑10μmol/L没食子酸和1/1000‑1/1100其体积的0.98‑1mol/L氢氧化钠溶液并混匀，制成混合溶液B；S4、向S3的混合溶液B中加入2‑2.5倍S3中没食子酸体积的9.8‑10μmol/L硝酸银溶液，得到混合溶液C，后将混合溶液C移至比色皿中，静置；S5、将静置后的混合溶液C与比色溶液进行比对，测定混合溶液C中三聚氰胺摩尔浓度。本发明提供的检测方法可简单、快速的检测牛奶中的三聚氰胺，十分经济高效。

说明书

技术领域

本发明属于食品检测领域，具体涉及一种牛奶中三聚氰胺的检测方法。

背景技术

三聚氰胺含氮量高达66％，因此常被添加到牛奶、动物饲料等产品中以增加其蛋白质含量。然而，过多的摄入三聚氰胺可引起肾结石或者导致婴幼儿肾功能衰竭甚至死亡。因此，在牛奶的商业化生产中，必须对成品奶进行三聚氰胺含量的测定，以防三聚氰胺含量超标的不合格奶流入市场而对消费者的身体健康造成损害。

现有的三聚氰胺检测方法有高效液相法、电位滴定法和气质联用法等，种类繁多且技术方案各不相同。然而，这些现有技术都具有共同的缺点：操作步骤繁琐且所用设备仪器造价高昂，难以进行商业化应用。所以，需要一种牛奶中三聚氰胺的检测方法，能够简便、快速的测定奶制品中三聚氰胺的含量是否达到国家标准。

发明内容

本发明提供了一种牛奶中三聚氰胺的检测方法，旨在解决上述背景技术中存在的问题。

本发明提供了一种牛奶中三聚氰胺的检测方法，包括以下步骤：

S1、将质量分数10％的三氯乙酸和待测牛奶以2-2.2:5的体积比混合，得到混合溶液A，混匀；

S2、将S1的混合溶液A离心，取上层清液，后调整上层清液的pH值至7-9；

S3、向S2的上层清液中依次加入1/1000-1/1100其体积的9.8-10μmol/L没食子酸和1/1000-1/1100其体积的0.98-1mol/L氢氧化钠溶液并混匀，制成混合溶液B；

S4、向S3的混合溶液B中加入2-2.5倍S3中没食子酸体积的9.8-10μmol/L硝酸银溶液，得到混合溶液C，后将混合溶液C移至比色皿中，静置；

S5、将静置后的混合溶液C与比色溶液进行比对，测定混合溶液C中三聚氰胺摩尔浓度；

比色溶液的制备包括S3-S4，区别在于，将S3中的上层清液替换成等体积的水，并配制多份混合溶液B，且S4中的多份混合溶液C中分别添加与没食子酸等体积的0-10μmol/L梯度系列的三聚氰胺溶液。

优选的，S1中，三氯乙酸和牛奶的体积比为2:5。

优选的，S1中，混匀的具体操作为超声混合后搅拌均匀。

优选的，超声混合时超声波的频率为25-130kHz。

优选的，超声混合的时间为18-22min。

优选的，搅拌时间为8-12min。

优选的，S2中，离心时的转速为8000-12000转。

优选的，S2中，离心的时间为13-17min。

优选的，S2中，用1mol/L NaOH溶液调节pH值。

优选的，S4中，静置的时间为13-17min。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明提供的一种牛奶中三聚氰胺的检测方法，通过使没食子酸与硝酸银发生反应，将纳米银粒子的制备、修饰和后续对三聚氰胺的检测集合成一步。没食子酸与溶液中的银离子络合，生成单层负电荷表面修饰的纳米银粒子，这些纳米银粒子分散在溶液中，使溶液呈亮黄色；当溶液中存在三聚氰胺时，被修饰后的纳米银粒子会发生团聚，从而使溶液变为棕色，且溶液中三聚氰胺含量越高，溶液颜色越深；本发明通过对牛奶的处理，去除了牛奶中的脂肪与蛋白质等显色物质，得到清液，对清液进行纳米银粒子处理后与比色溶液相比对，即可确定被测牛奶中三聚氰胺的摩尔浓度或摩尔浓度范围，操作简洁快速，适合短时间大批量的牛奶检测。

(2)本发明提供的一种牛奶中三聚氰胺的检测方法，其使用的原料均十分易得，且与被检测样本相比用量十分微少，故检测成本很低，同时不使用昂贵的仪器，适合商业化应用。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明，但不应理解为本发明的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1

本实施例提供了一种牛奶中三聚氰胺的检测方法，包括以下步骤：

S1：将质量分数10％的三氯乙酸2mL和待测牛奶5mL混合，得到混合溶液A，将混合溶液A在78HZ的频率下超声混合20min后再搅拌10min；

S2：将S1的混合溶液A以10000rpm的转速离心15min，得到上层清液，后用1mol/LNaOH溶液调整上层清液的pH值至7，调整完毕后上层清液的体积为3mL；

S3：将没食子酸30μL和1mol/L氢氧化钠溶液30μL依次加入到3mL上层清液中并搅拌均匀，制成混合溶液B；

S4：向S3的混合溶液B中加入10μmol/L硝酸银溶液60μL，得到混合溶液C，后将其移至厚度2cm的比色皿中，静置15min；

S5、将静置后的混合溶液C与比色溶液进行比对，确定上层清液中三聚氰胺摩尔浓度；

比色溶液的制备方法包括以下步骤：

a、将没食子酸30μL和1mol/L氢氧化钠溶液30μL依次加入到3mL二次蒸馏水中，制成混合溶液D；后重复上述操作制得12份混合溶液D；

b、向a的12份混合溶液D中分别加入0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0μmol/L三聚氰胺溶液30μL，后分别加入10μmol/L硝酸银溶液60μL，搅拌均匀后移至比色皿，静置15min后得到一系列比色溶液。

实施例2

本实施例所用原料与操作方式均与实施例1相同，区别在于：

S1中，超声波频率为130KHZ，超声混合时间为18min，搅拌时间为8min；

S2中，离心转速为12000rpm，离心时间为13min，调整上层清液的pH值至8；

S4中，静置时间为13min；

b中，静置时间为13min。

实施例3

本实施例所用原料与操作方式均与实施例1相同，区别在于：

S1中，超声波频率为25KHZ，超声混合时间为22min，搅拌时间为12min；

S2中，离心转速为8000rpm，离心时间为17min，调整上层清液的pH值至9；

S4中，静置时间为17min；

b中，静置时间为17min。

现选取实施例1作为优选实施例，对其进行试验以说明本发明的效果。

实验组处理如下：

称取待测牛奶样品共10份，每份5mL，取一份不加入三聚氰胺溶液，记为样品1，后向剩余9份中分别加入微量浓度不同且未知的三聚氰胺溶液，依次记为样品2-10。对样品1-10分别使用实施例1提供的步骤S1-S4进行处理，后使用实施例1提供的步骤a-b制作一系列比色溶液，将处理后的样品1-10分别与一系列比色溶液进行比对，确定样品1-10的三聚氰胺摩尔浓度或者摩尔浓度范围并记录。

对照组处理如下：

用电位滴定法测出样品1-10中三聚氰胺的摩尔浓度并记录。

实验组与对照组的的数据记录结果如下表1所示：

表1各样品中三聚氰胺含量测定结果

需要说明的是，本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例。

尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。