一种豆浆生熟度速测卡及其检测方法

摘要

一种豆浆生熟度速测卡及其检测方法，涉及豆浆生熟度检测领域，包括底板，底板上从左到右依次粘贴有样品垫、试剂垫、显色垫和吸水垫，样品垫的材质为聚酯纤维，样品垫使用磷酸盐缓冲溶液浸泡并干燥备用；试剂垫上浸渍有尿素溶液并干燥备用；显色垫上浸渍有质量百分数为0.5％的甲酚红。本发明自带过滤除杂功能，可将豆浆待测液中的色素及小颗粒物进行过滤吸附，降低了豆浆本底颜色对吸水纸上显色的遮盖作用，因此本发明适用于纯豆浆，五谷豆浆，黑豆豆浆及其它添加红枣，枸杞等市场上大部分各色豆浆；本发明操作简单、灵敏度高、技术适用、成本较低，操作安全，无易燃易爆溶液、无毒无害、无有机试剂。

说明书

技术领域

本发明涉及豆浆生熟度检测领域，具体涉及一种豆浆生熟度速测卡及其检测方法。

背景技术

近年来，因食用未煮熟的豆浆而造成的食品中毒事件层出不穷，生豆浆中含有多种抗营养因子，如脲酶，蛋白酶抑制剂，皂甙等，过量食用后会造成一系列不良反应，例如，皂甙能强烈刺激胃肠道黏膜，引起出血性炎症并产生中毒症状，蛋白酶抑制剂会降低胃液消化蛋白酶的能力，可能引起胰腺的肿大和增生，脲酶在胃肠内一定条件下会催化含氮物质分解产生氨，导致氨代谢紊乱，引发呕吐、腹泻等中毒现象；同时由于豆浆中皂素的作用，豆浆加热至80℃时会产生大量泡沫，产生“假沸”现象，人们会误以为豆浆已煮熟喝下并中毒，因此，需要一种检测方法来判定豆浆的生熟度。

鉴于豆浆中脲酶高温下可被破环其蛋白立体结构并失去活性，而其他抗营养因子的失活温度均低于脲酶的失活温度，只要加热煮沸将脲酶分解并失去活性，其他抗营养因子则都能被分解，同时脲酶的活性较易检出，故我们可根据脲酶的活性来判断豆浆生熟度。同时据研究表明，脲酶在同一温度下，保温时间不同，其脲酶钝化速率不同，由此可知，豆浆中的脲酶最好现场检测，若保温送检，则检测结果偏阴性。而现有的脲酶活性检测方法多为实验室检测，送检时间长，结果失真，因此，需要一种快速，准确的脲酶现场检测方法。

目前，检测脲酶的方法主要有国标纳氏试剂法，pH计快速鉴别法，泡沫试验法和速测盒法等，这些方法均能有效鉴别豆浆的生熟度：pH计快速鉴别法检测速度较快，但是易受外界干扰，误差有时候略大；纳氏试剂鉴别法结果可靠，但步骤较繁琐，不易用于现场检测；泡沫验证法中对于泡沫的有无和多少因人而异，没有严格的标准，易造成误差；速测试剂盒不仅能快速且准确的对生豆浆中的皂甙进行定性检测，而且有明确的评价标准，避免外界干扰，可以满足豆浆生熟度快速检测的要求，但试剂含乙酸酐及浓硫酸，具腐蚀性及催泪性，操作安全系数低，因此，开发一种简便，准确且安全的检测豆浆生熟度的速测卡刻不容缓。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种豆浆生熟度速测卡及其检测方法。

技术方案为：豆浆生熟度速测卡，包括底板，底板上从左到右依次粘贴有样品垫、试剂垫、显色垫和吸水垫，样品垫的材质为聚酯纤维，样品垫使用磷酸盐缓冲溶液浸泡并干燥备用，试剂垫上浸渍有尿素溶液并干燥备用；显色垫上浸渍有质量百分数为0.5％的甲酚红。样品垫采用磷酸盐缓冲溶液浸泡，当不同的豆浆样品液滴加在样品垫后，在样品垫层析过程中使样品液pH值趋于一致，保证后续脲酶催化尿素反应时，起始pH值一致，从而保证检测结果可靠性。

优选地，磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.01mol/L、pH值为7.0。

优选地，样品垫为白色，样品垫的长为20mm、宽为4mm。

优选地，尿素溶液质量浓度为1％～2％。

优选地，试剂垫材质为玻璃纤维，试剂垫为白色，试剂垫的长为12mm、宽为4mm。

优选地，甲酚红的量为0.2～0.5mg。

优选地，显色垫材质为层析纸，显色垫为黄色，显色垫的长为25mm、宽为4mm。

优选地，吸水垫采用吸水纸，吸水垫为白色，基于吸水垫的本底颜色为白色，在吸水垫5上的颜色变化程度更易观察，吸水垫的长15mm、宽为4mm。

优选地，底板为带粘性的PVC板，底板的长为70～80mm、宽为4mm。

采用上述豆浆生熟度速测卡对豆浆生熟度检测的方法，步骤为：使用滴管滴加待测豆浆4滴于样品垫上，15～45℃反应6分钟后于吸水垫上读取结果，将吸水垫上显示颜色与标准比色卡对比判断豆浆生熟度，其中，标准比色卡上标注的阴性、弱阳性、阳性分别对应豆浆中脲酶活性的强弱程度。

本发明通过建立一种新的样品处理和检测程序，在底板上固定样品垫，可对豆浆中的色素及颗粒物进行过滤，有效地降低样品基底对快检卡结果判断的干扰；同时，在样品垫上滴加一定量的待测豆浆后，当豆浆未完全煮熟时，残留的脲酶通过侧向层析与试剂垫上的尿素接触并催化尿素产生氨气，氨气易溶于水，可使样品液pH升高，样品液继续层析与显色垫上固定的甲酚红发生显色反应后继续层析最终被固定于吸水纸上，吸水纸显紫红色。若豆浆完全煮熟，则样品液中的脲酶失活，样品液继续层析并不能催化尿素产生氨气，同样不能使显色垫上固定的甲酚红颜色改变，继续层析后最终被固定于吸水纸上，则吸水纸显浅黄色，通过查看吸水纸显色程度与配套比色卡比色得到豆浆生熟度。

本发明的有益效果：

1：本发明自带过滤除杂功能，可将豆浆待测液中的色素及小颗粒物进行过滤吸附，降低了豆浆本底颜色对吸水纸上显色的遮盖作用，因此本发明适用于纯豆浆，五谷豆浆，黑豆豆浆及其它添加红枣，枸杞等市场上大部分各色豆浆；

2：本发明操作简单、灵敏度高、技术适用、环保安全，可对市场上大部分豆浆进行现场检测，无需仪器辅助，符合推广应用的相关原则和要求，简单培训或按照说明书便可直接操作，无需专业技术人员，检测时间短效率高，且成本较低，操作安全，无易燃易爆溶液、无毒无害、无有机试剂。

附图说明

图1：本发明提供豆浆生熟度速测卡结构图。

图中：1-底板、2-样品垫、3-试剂垫、4-显色垫、5-吸水垫。

具体实施方式

为了更好的理解本发明，下面结合实施实例进一步阐述本发明的内容，但本发明的内容并不仅仅局限于下述的实施例。

实施例一、豆浆生熟度速测卡制备：包括底板1，底板1上从左到右依次粘贴有样品垫2、试剂垫3、显色垫4和吸水垫5。样品垫2的材质为聚酯纤维，起到过滤除杂作用，样品垫2使用浓度为0.01mol/L、pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液浸泡并干燥备用，样品垫2为白色，样品垫2的长为20mm、宽为4mm。试剂垫3上浸渍有质量浓度为1％的尿素溶液并干燥备用，试剂垫3材质为玻璃纤维，试剂垫3为白色，试剂垫3的长为12mm、宽为4mm。显色垫4上浸渍有质量百分数为0.5％的甲酚红。显色垫4材质为层析纸，显色垫4为黄色，显色垫4的长为25mm、宽为4mm。吸水垫5采用吸水纸，吸水垫5为白色，吸水垫5的长15mm、宽为4mm。底板1为带粘性的PVC板，底板1的长为70～80mm、宽为4mm。

样品制备：黄豆浆生、熟各一份，五谷豆浆生、熟各一份，同时调整生豆浆及熟豆浆pH分别为6.8及7.2，备用，使用上述中制作的速测卡对样品进行检测。

检测步骤为：使用滴管滴加待测豆浆4滴于样品垫2上，15～45℃反应6分钟后于吸水垫5上读取结果，将吸水垫5上显示颜色与标准比色卡对比判断豆浆生熟度，其中，标准比色卡上标注的阴性、弱阳性、阳性分别对应豆浆中脲酶活性的强弱程度。

对比例一、豆浆生熟度速测卡制备及样品制备同实施例一，但样品垫2不使用浓度为0.01mol/L、pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液浸泡。

使用对比例1中制备的速测卡对样品进行检测(检测步骤与实施例一中检测步骤相同)。

对比例二、豆浆生熟度速测卡制备及样品制备同实施例一，但不粘贴样品垫。

使用对比例1中制备的速测卡对样品进行检测(检测步骤与实施例一中检测步骤相同)。

表1 实施例一、对比例一和对比例二提供的速测卡检测结果

表1结果表明，样品垫使用缓冲液浸泡后干燥，不同的豆浆样品液滴加在样品垫后，在样品垫层析过程中使样品液pH值趋于一致，保证后续脲酶催化尿素反应时，起始pH值一致，从而保证检测结果可靠性。同时，本发明添加样品垫，当滴加不同原料豆浆液后，可起到过滤除杂作用，使检测结果易辨别。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围。