曲奥舒凡的冻干物

摘要

描述了曲奥舒凡的冻干物，其在短的重构时间和高纯度和稳定性方面具有有利的特性，并且其在癌症的治疗以及用于骨髓或血液干细胞移植之前的调理治疗方面是特别有用的。

说明书

本发明涉及包含曲奥舒凡(treosulfan)的新的晶型B的冻干物，该冻干物具有用作药物组合物的非常有利的特性，并且特别是可以快速重构以形成即用溶液并显示出高稳定性和高纯度。

化学名称(2S,3S)-(-)1,4-二(甲磺酰氧基)-2,3-丁二醇或L-苏糖醇-1,4-二(甲磺酸酯)的曲奥舒凡具有以下化学式：

在DE 1 188 583和DE 1 193 938中已经公开了曲奥舒凡的化学合成，其例如通过使L-1,4-二溴丁烷-2,3-二醇与甲磺酸的银盐反应来进行。

曲奥舒凡是白消安的二羟基衍生物，并且鉴于其烷基化DNA的能力，它可以用作抗肿瘤剂。它本身或与其他化学疗法例如美法仑和达卡巴嗪组合用于卵巢癌的治疗(Baynes等人，Blood 96(11)：170a，摘要，No.731，2 000)。对于卵巢癌的治疗，使用曲奥舒凡的单一疗法涉及向患者给予8g/m

曲奥舒凡也已用于治疗晚期不可切除的非小细胞肺癌(Pawel等人，Onkologie21：316-319；1998)。

此外，EP 1227808A1公开了在将骨髓或血液干细胞移植至患者之前，将曲奥舒凡用于调理疗法中。在这样的调理疗法中，可以将曲奥舒凡的给药与任意一种其他药剂，例如环磷酰胺、卡铂、噻替哌(thiotepa)、美法仑、氟达拉宾、免疫抑制抗体的给药或对人体的照射有效地组合。与使用白消安相比，可以主要或完全避免严重的副作用。甚至可以使用高剂量的曲奥舒凡，而不会引起严重的肝脏、肺、肾或中枢神经系统毒性。在骨髓或造血干细胞的同种异体移植之前，调理阶段包括2至7天的时间段，曲奥舒凡的总剂量为至少20g/m

曲奥舒凡作为用于口服的胶囊和由曲奥舒凡组成的用于制备输注溶液的无菌粉是可商购的。该溶液在约15至30分钟内静脉内给予。这些产品中的曲奥舒凡是表现出粉末X-射线衍射图(XRPD)的晶型，其在7.69±0.2、15.43±0.2、18.74±0.2、19.14±0.2、19.77±0.2、20.15±0.2、20.28±0.2、21.24±0.2、21.74±0.2、22.07±0.2、22.96±0.2、23.24±0.2、24.36±0.2、25.29±0.2、28.05±0.2、28.28±0.2、28.97±0.2、30.10±0.2和40.55±0.2度的2θ处具有特征峰。该晶型在下文中称为A型，并且其XRPD图在图2中示出。

为了制备用于输注的溶液，将商业无菌粉末溶解在例如水中至50mg/ml的浓度，并将所得溶液用例如等渗的NaCl溶液稀释。然而，用作溶剂的水必须温热至30℃用于重构步骤。此外，粉末必须从小瓶的壁上完全除去。该步骤对于避免形成粘附至壁上的粉末颗粒很重要。曲奥舒凡的A型的这种粘性颗粒难以溶解，并且它们延长完全溶解的时间。由无菌粉末制备输注溶液的整个过程，包括小瓶的准备、水的必要温热以及粉末的完全溶解，需要约10分钟。此外，使用温热的溶剂增加不期望的降解的风险。

WO 2015/107534涉及曲奥舒凡的两种据称新颖且独特的多晶型，称为I型和II型。该文献缺乏任何关于如何获得II型的说明，且因此缺乏II型的可实施的公开内容。仅以非常普通的方式描述了用于制备I型的方法，并且据说其仅涉及从有机溶剂或其混合物中重结晶，其中提及了一些优选的有机溶剂。没有提供制备I型的具体过程的公开内容。I型给出的x-射线粉末衍射图非常类似于可商购产品的晶型A的x-射线粉末衍射图，其在下面的图2中表示，表明这些晶型实际上是相同的。最后，WO 2015/107534也描述了冻干制剂，据称其通常包括I型的曲奥舒凡。

然而，已知的冻干物具有几个缺点。特别地，已知的冻干物需要很长时间进行它们的重构，并且它们的甲磺酸和水的含量，特别是在储存之后，是不期望的高，并且因此它们的纯度和稳定性不令人满意。此外，显然已经使用的优化的冻干方法导致样品的性质在很大程度上变化，并且因此缺乏期望的重现性，这是非常有问题的，要考虑到这些冻干物旨在用作药物组合物。

甲磺酸(MSA)是曲奥舒凡的降解产物，如以下反应方案所示。

因此，其存在表明曲奥舒凡的降解。由于其强酸性，它加速了曲奥舒凡的酯基团的水解，并且因此增强降解过程。为此，甲磺酸的量应尽可能低。

因此，本发明的一个目的是避免已知的包含曲奥舒凡的产品的缺点。

该目的通过根据权利要求1至10的曲奥舒凡的冻干物实现。

本发明还涉及根据权利要求11至21的用于制备曲奥舒凡的冻干物的方法，以及根据权利要求22至24的曲奥舒凡的冻干物用于药物中。

根据本发明的冻干物的特征在于，它包含曲奥舒凡的晶型B，其呈现在20.87±0.20和23.47±0.20度的2θ处具有特征峰的X-射线粉末衍射图。

优选的是，晶型B呈现在20.87±0.20、23.47±0.20、26.20±0.20、29.65±0.20、30.81±0.20、34.54±0.20、35.30±0.20、36.87±0.20和46.24±0.20度的2θ处具有峰的X-射线粉末衍射图。

更优选的是，晶型B呈现基本如图1所示的X-射线粉末衍射图。

甚至更优选的是，晶型B呈现在以度2θ表示的至少一个并且优选所有以下区域a至f中不具有峰的X-射线粉末衍射图：

晶型B的特征优选还在于晶胞的空间群和参数a、b、c、α、β、γ以及通过单晶x-射线衍射(SCXRD)分析获得的晶胞体积，这些结构数据在下表中给出，还一起给出进一步的信息，特别是与商用的A型的结构数据相比的拟合质量有关的进一步的信息。

a、b和c＝晶胞的边的长度

α、β和γ＝晶胞的边之间的角度

V＝晶胞的体积

Z/Z'＝晶胞中的分子数

R1和wR2＝置信度值

T＝进行分析的温度

从这些数据可以看出，B型每个晶胞(空间群P2

根据本发明的冻干物特别包含相对于晶型B和晶型A的组合量至少96重量％，优选至少97重量％，更优选至少98重量％，并且甚至更优选至少99重量％的晶型B。

因此，根据本发明的冻干物包含仅非常少量的常规晶型A和非常大量的晶型B。高多晶型纯度对于将本发明的冻干物用作药物组合物是特别有利的。

在另一个优选的实施方案中，根据本发明的冻干物包含相对于冻干物的量至少75重量％，特别是至少80重量％，优选至少85重量％，更优选至少90重量％，并且甚至更优选至少95重量％的晶型B。

在又一个优选实施方案中，根据本发明的冻干物包含相对于冻干物的量小于20重量％，特别是小于15重量％，优选小于10重量％，并且更优选小于5重量％的非晶相。

少量的非晶相避免与该相相关的几个显著缺点。首先，非晶相倾向于导致不受控制的结晶。另外，它降解更快，干燥后残留水分含量更高，显示出差的流动性和润湿性，以及更容易带静电。所有这些性质对于用于药物目的的冻干物来说都是不期望的。

根据本发明的冻干物令人惊讶地显示出有利性质的组合，这些性质被认为是由大量的曲奥舒凡的晶型B引起的。具体地，它需要仅很短的时间在通常用于重构的介质中完全溶解，以得到即用注射或输注溶液。等渗盐溶液和注射用水通常用作这种介质。其他药学上可接受的溶液对于重构也是可能的，例如林格氏乳酸盐溶液或磷酸盐缓冲液。非常短的用于重构的时间段是非常有利的，因为它使临床工作人员能够在对患者进行预定给予之前直接新鲜地制备即用溶液，而不必考虑用于完全溶解的长等待时间。同样，在如此短的重构时间下，曲奥舒凡的不期望的降解反应的风险降低。

此外，根据本发明的冻干物还具有高纯度和稳定性，这由其非常高含量的活性成分曲奥舒凡和非常少含量的降解产物甲磺酸反映出来。

在一个优选的实施方案中，根据本发明的冻干物包含至少95重量％，特别是至少95重量％，优选至少98重量％，并且更优选至少99重量％的曲奥舒凡。

此外，根据本发明的冻干物具有仅少的甲磺酸含量，并且特别包含小于0.2重量％，优选小于0.1重量％，并且更优选小于0.05重量％的甲磺酸。特别少量的甲磺酸是本发明的冻干物的高储存稳定性的一种合理解释，因为这种酸加速曲奥舒凡的酯基团的水解并因此促进其降解。

即使冻干物在40℃和75％的相对湿度下储存三个月后，其特别包含小于0.2重量％，优选小于0.1重量％，并且更优选小于0.05重量％的甲磺酸。这是根据本发明的冻干物的优异储存稳定性的指标，使其非常适合用作药物组合物或其组分。

根据本发明的冻干物的另一个优点是，它可以使用温度为约20℃的溶剂进行重构，因此省去使用预热的溶剂的需要。此外，也不需要在重构前从小瓶壁上去除商用A型的粘性簇的繁琐准备。

此外，根据本发明的冻干物具有仅少量的水含量，并且包含的水的量特别是小于1重量％，优选小于0.5重量％，并且更优选小于0.1重量％，这通过卡尔·费歇尔滴定法(Karl Fischer titration)测定。

本发明还涉及用于制备冻干物的方法。根据本发明的方法包括冷冻干燥包含曲奥舒凡的水溶液。

经受冷冻干燥的水溶液在下文中也被称为“预冻干溶液”。

优选的是，水溶液包含水或水与至少一种有机溶剂的混合物作为溶剂。有机溶剂特别是乙酸。

溶剂中水的量特别是80至100重量％，并且优选90至100重量％。溶剂中乙酸的量特别是1至20重量％，并且优选2至10重量％。

即使当使用包含乙酸的预冻干溶液时，根据本发明获得的冻干物令人惊讶地包含仅非常少量的乙酸，并且特别是小于1.0重量％，优选小于0.5重量％，并且更优选小于0.2重量％的乙酸。

预冻干水溶液通常包含浓度为50至150mg/g，特别是50至100mg/g，并且更优选50mg/g至80mg/g的曲奥舒凡。

预冻干溶液还可以包括添加剂，例如增溶剂如聚山梨醇酯、环糊精、十二烷基硫酸钠、泊洛沙姆等；螯合剂如乙二胺四乙酸钠(sodium EDTA)、DTPA、钙立醇等；抗氧化剂如丁基化羟基甲苯、丁基化羟基茴香醚、甲硫氨酸、谷胱甘肽、焦亚硫酸钠、α-生育酚、巯基乙酸钠、半胱氨酸、抗坏血酸等；pH调节剂和缓冲剂如氢氧化钠、盐酸、柠檬酸、乙酸钠、精氨酸、天冬氨酸、碳酸氢钠、柠檬酸钠、柠檬酸二钠、柠檬酸三钠、马来酸、硫酸、磷酸氢盐等；填充剂如氨基酸如丙氨酸和精氨酸等；糖衍生物如实例蔗糖、右旋糖、甘露醇、海藻糖、甘露糖等；或聚合物如聚乙二醇、明胶、右旋糖酐等；稳定剂和张力调节剂如氯化钠、氯化镁、硫酸钠等。

在使水溶液经受冷冻干燥过程之前，通常使用常规过滤器如0.22μm过滤器对其进行过滤，以获得无菌溶液。

预冻干溶液的冷冻干燥通常通过使用通常用于制药目的的冷冻干燥机实现。通常，将溶液填充到合适的容器如小瓶中，并将容器放置在具有可冷却和可加热表面的常规冷冻干燥机中，在该表面上，溶液可以暴露于冷冻干燥过程的各种温度。为了实现干燥，溶液通常被冷冻并暴露在降低的大气压力下。结果，溶剂从冷冻溶液中的升华在很大程度上发生，其例如在为此提供的冷冻干燥机的较冷区域上沉淀。这之后通常在较高温度下进行二次干燥。冷冻干燥完成后，通常允许获得的冻干物达到室温，并将包含冻干物的容器在无菌条件下密封。

在优选的实施方案中，根据本发明的方法包括

(a)提供具有第一温度的水溶液，

(b)冷冻所述水溶液，其中所述水溶液以不超过3K/min的冷却速率从第一温度冷却至冷冻温度，和

(c)干燥步骤(b)中获得的冷冻溶液，以得到冻干物。

令人惊讶且非常有利的是，根据本发明的方法允许使用相当低的冷却速率，因为常规方法所采用的较高冷却速率需要使用非常复杂的设备。因此，根据本发明的方法非常经济。

此外，优选的是，步骤(b)中的冷却速率不大于2K/min，优选不大于1.5K/min，并且更优选不大于1.3K/min。在一个供选择的实施方案中，步骤(b)中的冷却速率特别是0.05至1.5，并且优选0.1至1.3K/min。

本发明的方法中的第一温度特别是15℃至95℃，优选20℃至50℃，并且更优选25℃至35℃。

所述方法中使用的冷冻温度特别是-40℃或更低，优选-60℃至-40℃，并且更优选-50℃至-40℃。

所述冷冻溶液在冷冻温度下被保持特别是至少1小时，优选1至10小时，并且更优选2至8小时。

在所述方法的另一个优选的实施方案中，步骤(c)中的干燥包括初级干燥，所述初级干燥是通过使冷冻溶液经受-25℃或更高的温度，优选-15℃至0℃的温度，并且使冷冻溶液经受0.03至1.0毫巴，优选0.1至0.6毫巴，并且更优选0.3至0.5毫巴的压力进行的。

在所述方法的供选择的另一个优选的实施方案中，步骤(c)中的干燥包括初级干燥，所述初级干燥是通过使冷冻溶液经受0℃或更高的温度，优选0℃至60℃，更优选20℃至60℃，甚至更优选30℃至50℃的温度，并且使冷冻溶液经受0.03至1.0毫巴，优选0.1至0.6毫巴，并且更优选0.3至0.5毫巴的压力进行的。

初级干燥优选进行至少5小时，并且特别是至少10小时。

还优选的是，在初级干燥之后，通过使初级干燥的产物经受至少30℃，优选30至50℃的温度，并且使初级干燥的产物经受0.03至1.0毫巴，优选0.1至0.6毫巴，并且更优选0.3至0.5毫巴的压力进行二次干燥。

二次干燥优选进行至少2小时，并且特别是至少4小时。

根据本发明的方法允许以高度可重现的方式制备具有优异性质的冻干物，这与提供在它们的性质上显著不同的产品的常规方法相比是一个显著的优点。

根据本发明的冻干物也被证明在医药中特别有用。因此，本发明还涉及根据本发明的冻干物，其用作药物。在另一个实施方案中，本发明还涉及根据本发明的冻干物，其用于治疗癌症并且特别是卵巢癌。在又一个实施方案中，本发明还涉及根据本发明的冻干物，其用于骨髓或血液干细胞移植之前的调理治疗。

在另一方面，本发明还涉及根据本发明的冻干物用于治疗癌症或用于骨髓或血液干细胞移植之前的调理治疗的用途。

在又一方面，本发明还涉及治疗患有癌症的患者的方法或在骨髓或血液干细胞移植之前调理患者的方法，所述方法涉及向患者给予由根据本发明的冻干物制成的溶液。

下面参照非限制性实施例更详细地解释本发明，所述非限制性实施例还包括特别适合于测定根据本发明的冻干物和曲奥舒凡的晶型B和晶型A的上述性质的方法。

实施例

在下文中，给出用于获得X-射线粉末衍射(XRPD)图、用于通过单晶X-射线衍射(SCXRD)进行研究、用于测定晶型B和晶型A的量以及非晶相的量、以及用于测定曲奥舒凡、乙酸、甲磺酸和水的量的方法。

此外，用于准备玻璃小瓶和用于测定重构行为的一般程序以及用于冷冻干燥的装置也如下所示。

用于冻干的玻璃小瓶在使用前用纯净水冲洗，并在300℃下去热原(depyrogenized)2小时。将冻干塞子高压灭菌(121℃，20min，2巴)，并在110℃下干燥7小时。

冷冻干燥在包括用于压差测量装置的具有0.4m

在研钵中用杵仔细手工研磨后，将相应的样品引入标准玻璃毛细管

使用配备有包含钼阳极

为了测定曲奥舒凡的晶型B和晶型A的量，在研钵中用杵仔细手工研磨后，将相应的样品引入标准玻璃毛细管

为了测定非晶相的量，将相应的样品与作为内标的25重量％的CaF

晶型A和晶型B是仅有的可以鉴定的晶相。

使用如下所示的反相高压液相色谱(RP-HPLC)测定相应的样品中曲奥舒凡的量：

使用如下所示的亲水相互作用液相色谱(HILIC)测定甲磺酸(MSA)的量：

酯化成乙酸乙酯后，通过HS-GC测定残留乙酸的量。

对于样品制备，每1g冻干物使用20ml水，用水重构一个小瓶的冻干物。将500μl重构样品与100μl饱和NaHSO

为了制备标准品，制备1mg/ml的乙酸储备溶液，并在水中稀释至含有25μg/ml至0.5μg/ml的5个单独的标准品。将每种储备溶液(500μl)与100μl饱和NaHSO

标准品双份制备。

使用用于定量残留溶剂的GC方法测定其乙酯形式的乙酸的量(参见Ph.Eur.2.4.24残留溶剂的鉴定和控制：系统A)。用于定量乙酸乙酯的量的色谱条件对应于用于测定残留溶剂的USP 467方法。

使用了以下气相色谱仪：

气相色谱仪和顶空进样器在以下条件下操作：

通过在室温下加入注射用水或0.45重量％的NaCl水溶液以赋予最终浓度为约50mg/ml测定冻干物的溶解行为。根据溶解时间和行为监测重构过程。

将约100mg的相应样品称量到用压接盖密封的玻璃小瓶中。将样品转移到加热至90℃的Metrohm(Filderstadt，德国)的756型卡尔·费歇尔库仑计(熔炉样品处理器774)的熔炉中。用注射针刺穿盖的隔膜，并且产生的水蒸气通过干燥氮气直接转移到卡尔·费歇尔库仑计的滴定室中。测量重复一次。空玻璃小瓶用于空白校正。

下表中给出的溶液通过在一次性聚丙烯(PP)烧杯中称量8.0g曲奥舒凡制备的。加入所需量的溶剂，并在温和搅拌下溶解曲奥舒凡，直到获得澄清溶液。通过目视控制检查完全溶解。之后，使用0.2μm过滤器过滤溶液。将溶液填充到标称体积为20ml的清洁和去热原的玻璃小瓶中。

将填充的小瓶部分塞住，并将样品装载到冷冻干燥机中，并根据以下冻干循环冷冻干燥。

通过XRPD分析将获得的所有冻干物鉴定为曲奥舒凡的晶型B。

冻干物饼成形良好且均匀，没有可见的缺陷。在室温下，施加轻轻摇动，在小于30秒的时间内将完全冻干物饼溶解在10ml注射用水中。不需要预热溶剂。也不需要去除粘附至小瓶壁上的粘性颗粒。冻干物的水残留量低于0.005重量％的定量极限。

下表中给出的溶液是通过将曲奥舒凡溶解在相应的溶剂中(30分钟，25℃，超声浴)制备的。过滤获得的溶液，并将过滤的溶液填充到清洁和去热原的玻璃小瓶中(每种制剂10小瓶)，将其在冻干位置塞住并密封在冻干袋中。

将样品装载到冷冻干燥机，并根据以下冻干循环冻干。

通过XRPD分析所有测试的冻干物被鉴定为曲奥舒凡的晶型B。

为了重构测试，将小瓶排气并打开，并使用10ml容量移液管加入10ml的0.45％重量的NaCl水溶液(室温)。实施例2和3两者的冻干物饼在仅1min内重构。不需要预热溶剂。也不需要去除粘附至小瓶壁上的粘性颗粒。

对于所有冻干物，测到仅非常少量的残留水。此外，所有样品均不含杂质，并显示出相似且高的曲奥舒凡的含量。乙酸含量低于0.003重量％的HS-GC分析的检测极限。

下表中给出的溶液是通过在150ml聚丙烯(PP)烧杯中称量10g曲奥舒凡制备的。加入溶剂，并于22℃的环境温度下在搅拌下将曲奥舒凡溶解。将获得的溶液填充到标称体积为20ml的清洁和去热原的玻璃小瓶中。

在冻干位置将小瓶塞住，并密封在冻干袋中。将样品装载到冷冻干燥机，并根据以下冻干循环冻干。

“atm.”表示大气压

通过XRPD分析所有测试的冻干物被鉴定为曲奥舒凡的晶型B。

所获得的冻干物饼是可以接受的。为了重构测试，将小瓶排气并打开，并加入20ml的0.45重量％的NaCl水溶液(约22℃)。冻干物饼在1.5min内重构。不需要预热溶剂。也不需要去除粘附至小瓶壁上的粘性颗粒。

所有样品均不含杂质，并具有非常高的曲奥舒凡的含量。乙酸含量非常低。

通过在30℃的温度下在搅拌下混合52.5g曲奥舒凡和603.75g水制备预冻干溶液。继续搅拌30分钟，直到曲奥舒凡完全溶解。使用0.2μm膜过滤器过滤后，将过滤的溶液填充到清洁和去热原的玻璃小瓶中。

在冻干位置将小瓶塞住，并密封在冻干袋中。将样品装载到冷冻干燥机中，并根据以下冻干循环冻干。

“atm.”表示大气压

通过XRPD分析获得的冻干物被鉴定为曲奥舒凡的晶型B。

所获得的冻干物饼是均匀的，没有任何缺陷。为了重构测试，将小瓶排气、打开，并加入100ml的0.45重量％的NaCl水溶液(室温)，以赋予曲奥舒凡的最终浓度为50mg/ml。冻干物饼在仅30秒内重构。不需要预热溶剂。也不需要去除粘附至小瓶壁上的粘性颗粒。

所有冻干物显示出非常高的曲奥舒凡的量和非常低的残留水的量。

将冻干物样品在80℃下储存96小时。所储存的样品仍然显示出非常高的>99.4重量％的曲奥舒凡的含量。在测试开始时，甲磺酸含量低于0.05％，并且在储存后为0.05％，证明冻干物非常稳定。

下表中给出的组合物的溶液是通过将水称入玻璃烧杯中并使用水浴将其温度调节至20℃制备的。加入相应量的曲奥舒凡，并将混合物搅拌直至完全溶解。将获得的溶液过滤，并将过滤后的溶液立即填充到清洁和去热原的玻璃小瓶中，将其在20℃下回火。

在冻干位置将小瓶塞住，并密封在冻干袋中。将样品装载到冷冻干燥机中，并根据以下冻干循环冻干。

通过XRPD分析获得的冻干物被鉴定为曲奥舒凡的B型。

所有冻干物均显示出非常高的曲奥舒凡的含量和非常低的残留水的量。此外，甲磺酸的量也非常低。

将冻干物样品在60℃下储存30天、在70℃下储存18天，并在80℃下储存5天。无论储存条件如何，在测试结束时，所有样品均在1.5min内完全溶解在20ml 0.45％重量的NaCl水溶液中。不需要预热溶剂。也不需要去除粘附至小瓶壁上的粘性颗粒。

此外，所有样品仍显示出非常高的曲奥舒凡的含量。

还将冻干物样品储存在40℃和75％相对湿度(r.H.)下3个月。所有储存的样品仍显示出非常高的曲奥舒凡的含量和非常低的甲磺酸的量，表明它们的优异的稳定性。

下表中给出的组合物的预冻干溶液是通过将水称入玻璃烧杯中并使用水浴将其温度调节至30℃制备的。加入相应量的曲奥舒凡，并将混合物在30℃下搅拌30分钟。将获得的溶液过滤，并将过滤的溶液立即填充到清洁和去热原的玻璃小瓶中，将其在30℃回火。

在冻干位置将小瓶塞住，并密封在冻干袋中。将样品装载到冷冻干燥机中，并根据以下冻干循环冻干。

所获得的冻干物饼是均匀的，没有任何缺陷。为了重构测试，将小瓶排气、打开，并加入100ml的0.45重量％的NaCl水溶液(室温)，以赋予曲奥舒凡的最终浓度为50mg/ml。冻干物饼在仅30秒内重构。不需要预热溶剂。也不需要去除粘附至小瓶壁上的粘性颗粒。

所有冻干物显示出非常低的残留水的量和非常低的甲磺酸的量。后者甚至低于0.01重量％的检测极限(LOD)。

使获得的冻干物还经受使用Rietveld精修的XRPD分析，以测定它们的结晶度以及它们的A型、B型和非晶相的量。晶型A和晶型B是仅有的可以检测到的晶相。下表中给出了结果。

冻干物的XRPD图示于图3中。

在配备有PTFE(聚四氟乙烯)密封件和搅拌器的小瓶(容量4.0ml)中称量99.8mg的曲奥舒凡。然后加入1.5ml预热至65℃的80重量％水和20重量％异丙醇的混合物。将所得溶液用注射器(容量5ml)完全吸收，并使用0.2μm过滤器过滤到第二小瓶(容量4.0ml)中。使用前，将注射器、第二小瓶和过滤器在65℃的温度下回火。使溶剂在室温下从开口的小瓶中蒸发至干燥，这导致晶体的形成。

获得的B型晶体的XRPD图示于图1中。

另外，在显微镜下选择合适的B型单晶，并通过单晶x-射线衍射(SCXRD)分析。所获得的数据在上面实施例之前的部分中说明。

在65℃下在搅拌下将约5g的曲奥舒凡溶解在约80g的2-丙醇中。然后将所得溶液用0.2μm过滤器过滤并冷却至15℃，这导致晶体的沉淀。收集晶体并在约40℃下干燥。

干燥的晶体的XRPD图示于图2中，并证实它是曲奥舒凡的晶型A。晶型A呈现在7.69±0.20、15.43±0.20、18.74±0.20、19.14±0.20、19.77±0.20、20.15±0.20、20.28±0.20、21.24±0.20、21.74±0.20、22.07±0.20、22.96±0.20、23.24±0.20、24.36±0.20、25.29±0.20、28.05±0.20、28.28±0.20、28.97±0.20、30.10±0.20和40.55±0.20度的2θ处具有特征峰的XRPD图。

另外，在显微镜下选择合适的A型的单晶，并通过单晶x-射线衍射(SCXRD)分析。所获得的数据在上面实施例之前的部分中说明。