突触囊泡蛋白SV2A的制备方法

摘要

本发明提供了一种突触囊泡蛋白SV2A的制备方法，包括如下步骤：1)过表达：将带有蛋白亲和纯化用标签的人源SV2A基因的第104‑742碱基通过病毒载体转入动物细胞，使其过表达；2)溶解：裂解动物细胞，用相对于膜蛋白过量的正十二烷基β‑D‑麦芽糖苷和胆固醇半琥珀酸三盐的混合溶液溶解膜蛋白；其中正十二烷基β‑D‑麦芽糖苷和胆固醇半琥珀酸三盐的质量浓度比是10∶1；3)纯化：离心，取上清使用亲和层析纯化，使用相对于膜蛋白过量的的毛地黄皂苷溶液替代蛋白溶液中的正十二烷基β‑D‑麦芽糖苷和胆固醇半琥珀酸三盐，再用分子筛进行再次纯化，得到SV2A蛋白。本发明能成功分离得到稳定构型的SV2A蛋白。