一种快速定量检测RNA加帽效率的方法

摘要

本发明公开了一种快速定量检测RNA加帽效率的方法，由以下步骤组成：S1.体外转录合成未加帽的RNA并除去模板DNA；S2.对RNA进行加帽处理；S3.对经S1、S2步骤得到的RNA进行单磷酸化处理：先利用碱性磷酸酶去磷酸化，RNA纯化后再利用多聚核苷酸激酶在RNA的5’端加上单磷酸；S4.用单磷酸酶除去进行单磷酸化处理后的RNA，并设置不用单磷酸酶处理的对照组；S5.跑胶检测，定量测定用单磷酸酶处理的RNA的条带亮度(记为n)以及对照组的RNA的条带亮度(记为N)，计算RNA的加帽效率为：(n/N)×100％。本发明的有益效果是：(1)可快速定量地检测出RNA的加帽效率，操作简单快速，结果有效准确；(2)该方法对样品需求量少，对RNA类型、长度等无特殊要求，适用范围广。